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植物鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒操作步驟:
【標準品的加樣】:設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;,。
【加樣】:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同),、待測樣品孔,。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。
【加酶】:每孔加入酶標試劑100μl,,空白孔除外。
【溫育】:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘,。
【配液】:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用,。
【洗滌】:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,。每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,,拍干。
【顯色】:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
【終止】:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
【測定】:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。
植物鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒樣本的運輸、轉(zhuǎn)存:
1. 新鮮細胞可用充氮法,,2-3天內(nèi)送達,;收集的細胞及裂解細胞冷凍液氮或干冰運輸。
2. 組織樣本收集齊后低溫凍存,將凍存的標本放置在裝有5-10公斤干冰的泡沫盒中密封保存運輸,。(干冰保證-40℃的溫度,,避免樣本反復(fù)凍融,5-10公斤的干冰可以保證5-7天的溫度,。
3. PCR相關(guān)實驗使用收集細胞,,可直接在細胞中加TRIzol充分裂解后用冰袋低溫運輸
4.細菌等樣品冰袋低溫運輸
5. 客戶所提供的試劑及試劑盒根據(jù)試劑本身保存要求運輸.
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