【膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)簡介】：是一種蛋白質(zhì),，由GDNF基因編碼。它于1991年被發(fā)現(xiàn)，是GDNF配體家族（GFL）的第一個(gè)成員,。GDNF是一種小蛋白,，能有效地促進(jìn)多種類型的神經(jīng)元的生存。它還負(fù)責(zé)將精原細(xì)胞確定為初級精母細(xì)胞,，即它被RET接收,，并通過與SCF形成梯度，將精原細(xì)胞分成兩個(gè)細(xì)胞,。GDNF的結(jié)構(gòu)與TGFβ2相似,，它有兩個(gè)指狀結(jié)構(gòu)，與GFRα1受體相互作用,。在原GDNF的分泌過程中發(fā)生的N-連接糖基化發(fā)生在其中一個(gè)指狀結(jié)構(gòu)的頂端,。成熟的GDNF的C端在與Ret和GFRα1受體的結(jié)合中起著重要作用。

產(chǎn)品名稱：人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子檢測試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：96T/盒,，可檢測90個(gè)樣,；48T/盒，可檢測42個(gè)樣,。

貯藏條件：2~8℃低溫保存

性狀：盒裝液體,，有效期6個(gè)月

特異性：同時(shí)檢測天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)

標(biāo)本：血清,、血漿,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊液,、心房水,、胸腹水、組織等

種屬齊全：人,、大小鼠,、植物土壤、雞,、犬,、猴、兔,、豚鼠,、豬ELISA檢測試劑盒等種屬

研究域：炎癥研究、生物學(xué),、研究,、新陳代謝,、信號通路、免疫學(xué),、傳染病,、其他研究

適用范圍：此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn)，禁用于臨床

 人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子檢測試劑盒組成及試劑配備：（檢測范圍請參考說明書）

實(shí)驗(yàn)所需自備試驗(yàn)器材：

1.      酶標(biāo)儀（450nm）

2.      高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL,、20-200uL、200-1000uL

3.      37℃恒溫箱

4.      蒸餾水或去離子水

操作流程如下：

【平衡試劑盒至常溫】：取出實(shí)驗(yàn)過程中所需板條,，剩余半條用自封袋密封放回4攝氏度,。

【加樣】：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,。在樣本孔先加樣本10μl再加稀釋液40μl,，（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
【加酶】：標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔總每孔加入酶標(biāo)試劑100μl（辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測抗體）空白孔除外,。
【溫育】：用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃恒溫箱溫育60分鐘。
【配液】：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用,。
【洗滌】：小心揭掉封板膜,，棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液,，靜置60秒后甩去洗滌液，吸水紙上拍干,。如此重復(fù)5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。

【顯色】：每孔先加入底物溶液A 50μl，再加入底物溶液B 50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光孵育15分鐘。
【終止】：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
【測定】：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

洗板時(shí)應(yīng)該注意以下問題：

1）及時(shí)更換破損吸液針,，避免破壞底板包被,。

2） 需每天校正注液量及殘液量，洗滌后殘液量不得大于2ul,。

3）注意調(diào)整洗液量,，洗液量過多溢出，過少將達(dá)不到洗滌效果。

4）關(guān)機(jī)前使用蒸餾水沖洗管道,，避免洗滌的結(jié)晶物堵塞管道,。

5） 針對不同廠家酶標(biāo)注意調(diào)整吸液頭下降高度，避免沖洗針頭卡住酶標(biāo)板,。

6）不同試劑盒的洗液嚴(yán)禁混合使用,。

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