一.   實(shí)驗(yàn)原理：試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被抗原的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗原,，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的甲型肝炎病毒IgM抗體（HAV-IgM）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度,。

二.  人抗甲型肝炎病毒IgM(HAV-IgM)ELISA試劑盒組成及其配置：

三.   常見問題解答：

1.     【高背景或陰性對照值偏高】

可能的原因：陰性對照孔被陽性對照或樣品污染；抗體非特異性結(jié)合,；酶結(jié)合物過濃,；孵育溫度過高,；底物在使用前曝光；讀板前停留時間過長

上海軒澤康生物為您提供解決方案：洗滌時勿將洗液溢出孔外,；建議更換封閉液,；檢查酶結(jié)合物是否按照說明書規(guī)定稀釋；檢查孵育箱的溫度是否正確,、穩(wěn)定,；應(yīng)保存在暗處、避光,；加終止液后3分鐘內(nèi)讀數(shù),。

2.     【陽性對照值偏低或低吸光度】

可能的原因: 試劑未平衡至室溫;檢測體積偏小;孵育時間過短;底物受污染;樣本中有抑制劑。

上海軒澤康生物為您提供解決方案：實(shí)驗(yàn)開始前,，將試劑盒從冰箱內(nèi)取出平衡至室溫（20-25℃）,；檢查移液器吸液通道是否堵塞；使用計時器,，準(zhǔn)確孵育時間,；使用新配置的試劑，重新實(shí)驗(yàn),；疊氮鈉會抑制HRP酶的活性,。

四. 人抗甲型肝炎病毒IgM(HAV-IgM)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)：

1.  試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘,。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,，這屬于正常現(xiàn)象,，水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用,。

2.  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存,。

3.  預(yù)處理后的樣本無需稀釋,，直接取50μL加樣即可。

4.  嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間,、加液量及順序進(jìn)行溫育操作,。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻。