人抗蛋白C抗體(aPC)ELISA檢測試劑盒 定性在國內(nèi)眾多實驗室被廣泛使用,，深受廣大科研者的好評,。上海軒澤康生物專ye供應(yīng)酶聯(lián)免疫分析試劑盒，部分現(xiàn)貨供應(yīng)產(chǎn)品有人,、大鼠,、小鼠、兔,、豬,、犬、雞、猴,、植物等ELISA試劑盒,。所有elisa試劑盒均提供免費代測，實驗全程提供技術(shù)指導(dǎo),。歡迎咨詢,、訂購！

一.   檢測原理：試劑盒采用一步間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預(yù)先包被抗原的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測抗抗體,，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值）,，與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中人抗蛋白C抗體（aPC）的存在與否,。

二. 96T試劑盒組成及其配置：

①微孔酶標(biāo)板（ 12 孔×8 條）,；

②陰性對照 0.5mL；

③陽性對照 0.5mL,；

④檢測抗原-HRP 10mL；

⑤20×洗滌緩沖液 25mL,；

⑥稀釋液 6mL,；

⑦底物 A 6mL；

⑧底物 B 6mL,；

⑨終止液 6mL,；

⑩封板膜 2 張；說明書 1 份,；自封袋 1 個.

備注：20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋,，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。

三. 人抗蛋白C抗體(aPC)ELISA檢測試劑盒 定性操作步驟:

①從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回 4℃,。

②設(shè)置陰、陽性對照孔和樣本孔,，陰,、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各 50μL；

③待測樣本孔先加待測樣本 10μL,，再加稀釋液 40μL,；

④隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體 100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

⑤棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液,，靜置 1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板 5 次（也可用洗板機(jī)洗板）。

⑥每孔加入底物 A,、B 各 50μL,，37℃避光孵育 15min。

⑦每孔加入終止液 50μL,，15min 內(nèi),，在 450nm 波長處測定各孔的OD 值。

四. 實驗結(jié)果判斷：

①試驗有效性：陽性對照孔 OD 值平均值≥1.00,； 陰性對照孔 OD 值平均值≤0.15,。

② 臨界值（Cut off）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

③陰性判斷：樣品 OD 值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性

④陽性判斷：樣品 OD 值＞臨界值（Cut off）,，樣品為陽性

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