檢測原理：試劑盒采用一步間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。往預(yù)先包被免疫缺陷病毒抗原的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測抗抗體,，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較,，從而判定標(biāo)本中抗免疫缺陷病毒抗體（HIV Ab）的存在與否,。

上海軒澤康生物96T試劑盒人免疫缺陷病毒抗體(HIV-Ab)ELISA試劑盒組成及其配置：

①微孔酶標(biāo)板（ 12 孔×8 條）；

②陰性對(duì)照 0.5mL,；

③陽性對(duì)照 0.5mL,；

④檢測抗原-HRP 10mL；

⑤20×洗滌緩沖液 25mL,；

⑥稀釋液 6mL,；

⑦底物 A 6mL；

⑧底物 B 6mL,；

⑨終止液 6mL,；

⑩封板膜 2 張；說明書 1 份,；自封袋 1 個(gè).

備注：20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋,，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)所需自備試驗(yàn)器材：

1. 酶標(biāo)儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL,、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

人免疫缺陷病毒抗體(HIV-Ab)ELISA試劑盒常見問題解答：

1.   問：如何選擇合適的陽性對(duì)照,？

上海軒澤物解答：陽性對(duì)照的基本組成應(yīng)該盡量與檢測樣本的組成一致,，一般陽性對(duì)照多以含蛋白保護(hù)劑的緩沖液為基質(zhì)，加入一定量的待檢物質(zhì),。比如：以人血清為標(biāo)本的測定,，陽性對(duì)照多用確定的病人血清或者以覆蓋人血漿為原料加入一定量標(biāo)準(zhǔn)品。

2. 問：我能否在實(shí)驗(yàn)開始前*收集樣品,？

上海軒澤物解答：可以,。如若收集的樣本不能及時(shí)進(jìn)行檢測，請(qǐng)保存至-20℃或按照說明書進(jìn)行保存,。應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

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