檢測前準備工作：

1. 請?zhí)崆?20 分鐘從冰箱中取出試劑盒,，平衡至室溫。2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,，屬于正?，F(xiàn)象；放置室溫,，輕搖均勻,，待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液?？蓪?20ml 濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml 工作濃度的洗滌液,，未用完的放回4℃3. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20 稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加 19 份蒸餾水,。

實驗原理：試 劑 盒 采 用 雙 抗 體二步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預(yù)先包被人磷酸化α-突觸核蛋白(p-α-SYN)捕獲抗體包被微孔中，依次加入標本,、標準品孵育,，加入生物化抗體進行抗體生物su化，經(jīng)過溫育后加入HRP標記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人磷酸化α-突觸核蛋白（p-α-SYN）呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，計算樣品濃度。

上海軒澤康生物有限公司人(p-α-SYN)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 定量提供免費代測服務(wù),，質(zhì)量可靠,，產(chǎn)品具有靈敏度高、效果穩(wěn)定等特點,。需購買我司產(chǎn)品的新老客戶請聯(lián)系我司工作人員,。

操作步驟：

1．從室溫平衡 60min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃,。

2．設(shè)置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL。

3．樣本孔中加入待測樣本 50μL,；空白孔不加,。樣本如需稀釋，按照要求用試劑盒配套稀釋液稀釋樣本,。

4．每孔加入生物su標記抗體50μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 30min,；標準孔空白孔不加,！

5．棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置 1min，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6．除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min,。

7．棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置 1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）,。

8．每孔加入底物 A、B 各50μL,，37℃避光孵育15min,。

9．每孔加入終止液 50μL，15min 內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的 OD 值,。

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