人卵巢癌抗原(CA125)ELISA試劑盒 定性檢測在國內(nèi)眾多實驗室被廣泛使用,，深受廣大科研者的好評,。上海軒澤康生物專ye供應酶聯(lián)免疫分析試劑盒，部分現(xiàn)貨供應產(chǎn)品有人,、大鼠,、小鼠,、兔、豬,、犬,、雞、猴,、植物等ELISA試劑盒,。所有elisa試劑盒均提供免費代測，實驗全程提供技術(shù)指導,。歡迎新老客戶咨詢,、訂購！

檢測原理：試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預先包被人卵巢癌抗原（CA125）抗體的包被微孔中,，依次加入標本、HRP標記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值）,，與CUTOFF值相比較,，從而判定標本中人卵巢癌抗原（CA125）的存在與否。

96T試劑盒組成及其配置：

①微孔酶標板（ 12 孔×8 條）,；

②陰性對照 0.5mL,；

③陽性對照 0.5mL；

④檢測抗體-HRP 10mL,；

⑤20×洗滌緩沖液 25mL,；

⑥稀釋液 6mL；

⑦底物 A 6mL,；

⑧底物 B 6mL,；

⑨終止液 6mL；

⑩封板膜 2 張,；說明書 1 份,；自封袋 1 個.

備注：20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水,。

人卵巢癌抗原(CA125)ELISA試劑盒 定性檢測操作步驟:

①從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。

②設(shè)置陰,、陽性對照孔和樣本孔,，陰,、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各 50μL,；

③待測樣本孔先加待測樣本 10μL,，再加稀釋液 40μL；

④隨后陰,、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體 100μL,，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min,。

⑤棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液,，靜置 1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復洗板 5 次（也可用洗板機洗板）,。

⑥每孔加入底物 A、B 各 50μL,，37℃避光孵育 15min,。

⑦每孔加入終止液 50μL，15min 內(nèi),，在 450nm 波長處測定各孔的OD 值,。

實驗結(jié)果判斷：

①試驗有效性：陽性對照孔 OD 值平均值≥1.00； 陰性對照孔 OD 值平均值≤0.15,。

② 臨界值（Cut off）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

③陰性判斷：樣品 OD 值＜臨界值（Cut off）,，樣品為陰性

④陽性判斷：樣品 OD 值＞臨界值（Cut off），樣品為陽性