人卵巢癌抗原(CA125)ELISA試劑盒 定性檢測在國內(nèi)眾多實驗室被廣泛使用,，深受廣大科研者的好評,。上海軒澤康生物專ye供應(yīng)酶聯(lián)免疫分析試劑盒,，部分現(xiàn)貨供應(yīng)產(chǎn)品有人、大鼠,、小鼠,、兔、豬,、犬,、雞、猴,、植物等ELISA試劑盒,。所有elisa試劑盒均提供免費代測,，實驗全程提供技術(shù)指導(dǎo)。歡迎新老客戶咨詢,、訂購,！

檢測原理：試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被人卵巢癌抗原（CA125）抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值）,，與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中人卵巢癌抗原（CA125）的存在與否,。

96T試劑盒組成及其配置：

①微孔酶標(biāo)板（ 12 孔×8 條）,；

②陰性對照 0.5mL；

③陽性對照 0.5mL,；

④檢測抗體-HRP 10mL,；

⑤20×洗滌緩沖液 25mL；

⑥稀釋液 6mL,；

⑦底物 A 6mL,；

⑧底物 B 6mL；

⑨終止液 6mL,；

⑩封板膜 2 張,；說明書 1 份；自封袋 1 個.

備注：20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋,，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水,。

人卵巢癌抗原(CA125)ELISA試劑盒 定性檢測操作步驟:

①從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃,。

②設(shè)置陰,、陽性對照孔和樣本孔，陰,、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照各 50μL；

③待測樣本孔先加待測樣本 10μL,，再加稀釋液 40μL,；

④隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體 100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min,。

⑤棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液,，靜置 1min，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板 5 次（也可用洗板機洗板）。

⑥每孔加入底物 A,、B 各 50μL,，37℃避光孵育 15min。

⑦每孔加入終止液 50μL,，15min 內(nèi),，在 450nm 波長處測定各孔的OD 值。

實驗結(jié)果判斷：

①試驗有效性：陽性對照孔 OD 值平均值≥1.00,； 陰性對照孔 OD 值平均值≤0.15,。

② 臨界值（Cut off）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

③陰性判斷：樣品 OD 值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性

④陽性判斷：樣品 OD 值＞臨界值（Cut off）,，樣品為陽性