檢測(cè)原理：試劑盒采用一步間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。往預(yù)先包被生長(zhǎng)激素（GH）抗原的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗抗體,，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較,，從而判定標(biāo)本中抗生長(zhǎng)激素抗體IgG（Anti-GH IgG）的存在與否,。

操作步驟：人抗生長(zhǎng)激素抗體IgGELISA試劑盒 定性分析

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

2.  設(shè)置陰,、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔，陰,、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照,、陽(yáng)性對(duì)照各50μL；

3.  待測(cè)樣本孔加待測(cè)樣本10μl,，稀釋液40μL,；

4.  隨后陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗原100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi),，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

人抗生長(zhǎng)激素抗體IgGELISA試劑盒 定性分析結(jié)果判斷：

1.  試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔OD值平均值≥1.00,；

陰性對(duì)照孔OD值平均值≤0.15,。

2.  臨界值（Cut off）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15

3.  陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性

4.  陽(yáng)性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off）,，樣品為陽(yáng)性

ELISA試劑盒的使用過(guò)程中常見(jiàn)的問(wèn)題有很多。如：加樣器不正 確,、保溫設(shè)備不良,、洗滌用水不規(guī)范等等對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響極大。我司為您準(zhǔn)備了以下解決問(wèn)題的方法：

1.     樣品加樣時(shí)要仔細(xì),，以防漏加錯(cuò)加,。加樣后，反復(fù)抽吸3次混勻,，防止血清聚集在孔底,，從而導(dǎo)致非特異性吸附。

2.     每次洗滌時(shí)應(yīng)靜止30秒,，選用吸水紙作為襯墊,，洗滌后甩干孔內(nèi)水分 。

3.     消除板底殘留的液體和手指印,，否則影響OD值,。

4.     在儲(chǔ)存和溫育時(shí)應(yīng)避免強(qiáng)光直射。