檢測原理：試劑盒采用雙抗原一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被Ⅱ型膠原（ColⅡ）抗原的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗原,，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的Ⅱ型膠原抗體（ColⅡ Ab）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度,。

人Ⅱ型膠原抗體(ColⅡ Ab)ELISA檢測試劑盒組成及試劑配備：（標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5）濃度依次為：0、4,、8,、16、32,、64 ng/mL）

1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔),。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):0.3ml*6管

3. 稀釋液(Sample Diluent):1×6ml/瓶

4.檢測抗原-HRP（HRP-Conjugate reagent）:1x 10ml/瓶

5. 終止液(Stop Solution):1×6ml/瓶

6. 底物溶液（Chromogen Solution）:6ml*2瓶。

7. 20x濃縮洗滌液(20X WashSolution):1×25ml/瓶,

8.說明書（User manual）: 1份

9.封板膜（Closure plate membrane）:2份

10.自封袋（Sealed bags）：1個

上海軒澤康生物ELISA檢測試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢：

【品質(zhì)保障】  公司秉承誠信經(jīng)營的理念,，出庫質(zhì)檢把控嚴(yán)格,，運(yùn)輸全程跟蹤。有任何質(zhì)量問題包退包換,。

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人Ⅱ型膠原抗體(ColⅡ Ab)ELISA檢測試劑盒操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.  樣本孔先加待測樣本10μL,，再加稀釋液40μL,；空白孔不加。

4.  除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗原100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

5.  棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值,。