上海軒澤康生物有限公司提供售前售后技術(shù)指導(dǎo),，樣本采集、保存,、試驗(yàn)操作,、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制等相關(guān)的技術(shù)問題都有詳細(xì)的解答，有任何疑問都可與我們溝通,，期待與您的合作,！

小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒性能：

1.  準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900,。

2.  靈敏度：zui低檢測(cè)濃度小于1.0 pg/mL,。

3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4.  重復(fù)性：板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%,。

操作步驟：

【標(biāo)準(zhǔn)品的加樣】：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,。
【加樣】：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔,。樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,，再加稀釋液40μL,；空白孔不加。

樣品最終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻,。
【加酶】：每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,，空白孔除外。
【溫育】：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘,。
【配液】：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用,。
【洗滌】：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次,，拍干。
【顯色】：每孔先加入底物溶液A 50μl,，再加入底物溶液B 50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘,。
【終止】：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
【測(cè)定】：以空白孔調(diào)零,，450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：

1.  實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,，避免交叉污染,。

2.  加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度,，避免第一孔與最后一孔間的時(shí)間間隔過大,，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。

3.  孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行,。

4.  反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深,，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。

5.  建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高,，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。

6.  建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本）