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人糖基化依賴的細胞黏附分子ELISA試劑盒組成及其配置：

1. 酶聯(lián)板(Assay plate )

2. 標準品(Standard)

3. 稀釋液(Sample Diluent)

4.檢測抗體-HRP（HRP-Conjugate reagent

5. 終止液(Stop Solution)

6. 底物溶液（Chromogen Solution）

7. 20x濃縮洗滌液(20X WashSolution)

8.說明書（User manual）

9.封板膜（Closure plate membrane）

10.自封袋（Sealed bags）

實驗前的準備：

1） 確定試劑盒在有效期內(nèi)

2） 仔細閱讀說明書,，按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量,、體積）

3） 提前準備好所有實驗額外所需的設備（如離心機、37℃恒溫箱,、高精度加樣器及槍頭,、酶標儀等）

4） 標本制備要規(guī)范，每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備（貯存）,，盡量分裝做備份,。短期內(nèi)無法實驗者注意低溫保存。根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量

5） 按說明書將所有試劑平衡至室溫,，配制所需試劑,。嚴格按照上海軒澤康生物有限公司說明書進行實驗步驟。

人糖基化依賴的細胞黏附分子ELISA試劑盒操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

2.  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,。

3.  樣本孔先加待測樣本10μL,，再加稀釋液40μL；空白孔不加,。

4.  除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液,，靜置1min，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.   每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min。

7.   每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值。