人羧化基質(zhì)Gla蛋白(cMGP)ELISA檢測試劑盒組成： 微孔酶標板（ 12 孔×8 條）,；標準品 （0.3mL*6 管 ）；本稀釋液（ 6mL）,；檢測抗體-HRP （10mL） ,；20×洗滌緩沖液 （25mL， 按說明書進行稀釋）,；底物 A（ 6mL）,；底物 B （6mL）；終止液 （6mL） ,；封板膜,； 說明書 ；自封袋 ,。

操作程序總結：

1） 準備試劑,，樣品和標準品。

2） 加入準備好的樣品和標準品,，37℃反應30分鐘,。

3） 洗板5次，加入酶標試劑,，37℃反應30分鐘,。

4） 洗板5次,，加入顯色液A、B,，37℃顯色10分鐘,。

5） 加入終止液，15分鐘內(nèi)讀OD值

6） 計算：以標準物的濃度為橫坐標,，OD 值為縱坐標,，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的 OD 值由標準曲線查出相應的濃度,；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標準物的濃度與 OD 值計算出標 準曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD 值代入方程式,，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù)， 即為樣品的實際濃度,。

注意事項：

1.  實驗操作中必須使用一次性吸頭,，避免交叉污染。

2.  加樣：加樣時,，要控制加樣速度,，避免第一孔與最后一孔間的時間間隔過大，否則將會導致不同的預孵育時間,，從而影響實驗的準確性以及重復性,。

3.  孵育：嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行,。 

4.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,。

5.  建議實驗前預測樣品含量,，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋,，計算結果時乘以相應的稀釋倍數(shù),。 

6.  建議使用本試劑盒時先做預實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本）,，如果對本試劑盒有任何疑問,，可和所購經(jīng)銷商聯(lián)系，如果因運輸過程導致試劑盒失效,，可要求調(diào)換,，但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。

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