【白細(xì)胞介素1β(IL-1β)簡介】：又稱白細(xì)胞熱原、白細(xì)胞內(nèi)源性介質(zhì),、單核細(xì)胞因子,、淋巴細(xì)胞激活因子等名稱，是一種細(xì)胞因子蛋白,，由IL1B基因編碼,。白細(xì)胞介素1（IL-1）有兩種基因，IL-1α和IL-1β（本基因）,。IL-1β前體被細(xì)胞膜caspase 1（白細(xì)胞介素1 beta轉(zhuǎn)化酶）裂解,，形成成熟的IL-1β。它與IL-23結(jié)合,，誘導(dǎo)γδT細(xì)胞表達(dá)IL-17,、IL-21和IL-22，這種誘導(dǎo)表達(dá)是在沒有額外信號的情況下進(jìn)行的,，這表明它參與了自身免疫性炎癥的調(diào)控,。

上海軒澤康生物有限公司提供的產(chǎn)品：人白細(xì)胞介素1β (IL-1β)ELISA檢測試劑盒，是僅供科研使用,，不用于臨床診斷,。試劑盒規(guī)格：48T/盒可以檢測42個(gè)樣本；96T/盒可以檢測90個(gè)樣本,。

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。往預(yù)先包被白細(xì)胞介素1β（IL-1β）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素1β（IL-1β）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度,。

樣品收集、處理及保存方法：

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后,，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。

2.  血漿：EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝,，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

 實(shí)驗(yàn)需自備物品：

1.      酶標(biāo)儀（450nm）

2.      高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL,、20-200uL,、200-1000uL

3.      37℃恒溫箱

人白細(xì)胞介素1β (IL-1β)ELISA檢測試劑盒性能：

1.  準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,，大于等于0.9900,。

2.  靈敏度：zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL,。

3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。

4.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%,。

5.  貯藏：2-8℃,，避光防潮保存,。

技術(shù)小提示：

1.      當(dāng)混合或重溶蛋白溶液時(shí)，盡量避免起沫,。

2.      為了避免交叉感染,，配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品,、上樣,、加不同試劑都需要更換槍頭,。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。

3.      每次孵育時(shí),，請正確使用封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性,。

4.      混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無色，請避光保存,；假如微孔板后,，將由物色變成不同深度的藍(lán)色,。

5.      終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致,；加入終止液后,，孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃,；若孔內(nèi)有綠色,，則表明孔內(nèi)液體未混勻,；請充分混合,。

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