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小麥粉中嘔吐毒素含量的免疫親和柱法

閱讀：552 發(fā)布時(shí)間：2023-1-9

本方法適用于谷物及其制品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的測定,。參照《GB 5009.111-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙?；苌锏臏y定》。

一,、樣品提取

稱取試樣10.0 g(精確至0.001 g)于100 mL離心管中,，加入2.0 g PEG 8000，再加50 mL蒸餾水,，均質(zhì)3 min,，6000 r/min離心5 min，取上清液過玻璃纖維濾紙,，濾液備用,。

二、SPE柱凈化

將低溫下保存的免疫親和柱恢復(fù)至室溫,；待免疫親和柱內(nèi)原有液體流盡后,，取上述樣液5 mL移至玻璃注射器筒中過柱（流速1滴/秒）；再取10 mL蒸餾水分兩次快速過柱,，棄去流出液,，抽干小柱；1 mL甲醇洗脫,，45℃氮吹至近干,，1 mL初始流動相復(fù)溶，渦旋1 min,過0.45 um有機(jī)濾膜,，供高效液相色譜測定,。

三、儀器條件

儀器：Agilent 1260

色譜柱：Agilent HC-C18柱(4.6X250 mm,5 μm)

檢測器：Agilent 紫外檢測器

檢測波長：218 nm

流動相：A：甲醇 B：水

洗脫方式：等度洗脫甲醇：水=20：80

流速：0.8 mL/min

進(jìn)樣體積：20 μL

√

四,、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表1. 小麥粉基質(zhì)中嘔吐毒素的不同添加回收結(jié)果