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大鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3A (ELISA)試劑盒
大鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3A (ELISA)試劑盒
雙抗體夾心法
1. 包被:以 0.05 MPH 稀釋抗體至蛋白質(zhì)含量為 1-10 μg/ml。 9. 含氧碳酸鹽涂層緩沖液,。在 4 °C 下將 0.1 ml 添加到每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中過夜,。次日,將溶液從孔中取出并用洗滌緩沖液洗滌3次,,每次3分鐘,。 (以下也清洗)。
2,、加樣:將0.1ml特定稀釋度的待測樣品加入上述包被的反應(yīng)液中,,37℃孵育1小時。然后洗,。 (同時創(chuàng)建空白孔,、陰性對孔和陽性對照孔)。
3. 酶標抗體的加入:每個反應(yīng)孔中加入新鮮稀釋的酶標抗體(滴定后稀釋)0.1ml,。在 37°C 下孵育 0.5-1 小時并洗滌,。
4、加入底物溶液顯色:在每個反應(yīng)孔中加入0.1ml臨時配制的TMB底物溶液,,37℃孵育10-30分鐘,。
5. 反應(yīng)結(jié)束:每孔加入 0.05 ml 2M 硫酸。
6,、結(jié)果評價:在白色背景上可以用肉眼直接觀察結(jié)果,。反應(yīng)孔越深,陽性反應(yīng)越強,,陰性反應(yīng)無色或極淡,。表示“-"符號。您還可以測量 OD 值,。在 450 nm(ABTS 顯色時為 410 nm)使用 ELISA 檢測器,,使用空白對照孔至零,如果大于 OD 值的 2.1 倍,,則測量每個孔的 OD 值,。陰性對照為陽性。
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