日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

在ELISA中,，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:

（1）　固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體,，如聚氯乙烯,、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板,、試管,、珠粒等。常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應(yīng),，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

（2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時,，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間,。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18～24小時,。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1,、1.0和10μg/ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時,，觀察陽性標本的OD值,。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg/ml,。

（3）　酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）,。然后再固定其它條件或采取“方陣法"（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度,。

ELISA試劑盒檢測過程中的注意事項

一,、ELISA實驗通用規(guī)則

1、要保證移液槍的準確性,，誤差不能超過2%,。可用水和電子天平進行確定,。但最好有專業(yè)人員進行矯正,。

2、要配備20ul,、50ul,、100ul、1000ul和排槍各一支,。吸取不同的液體后,，要更換槍頭。即使是吸取標準品時,。

3,、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫,，以使結(jié)果更穩(wěn)定,。

4、實驗時,，要使底物避光保存,。

5、用槍吸取液體時速度不能太快,，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確,。

6、吸取液體時,，要用量程和需要量接近的槍去吸,，減少誤差。

7,、將液體加到酶標孔中時,，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,，液滴會自然流下去,。

8、液體全部加完后,，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能,。

9,、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā),。

10,、洗板時，每次洗液加入后,，應(yīng)靜置1分鐘,，使清洗更加*。沒有洗板機時,，倒去液體后,，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

11,、洗液不夠時,，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液,，加入0.1%的吐溫20作為洗液,。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

12,、底物是光敏感的,，要在臨用前現(xiàn)配。

13,、檢測前,，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上,。

14,、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性,，應(yīng)盡量避免接觸,。

15、待檢樣品要澄清,，否則會影響結(jié)果,。

16、溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定,。

17,、應(yīng)盡量做雙孔實驗，這樣才能保證數(shù)據(jù)的準確性,。

18,、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。