小鼠蛋白酪氨酸磷酸酶抗體 （ELISA）試劑盒

規(guī)格：96T/48T
產(chǎn)品用途：僅供科研檢測,，不得用于臨床
廣州奧瑞達生物特色服務(wù)： 免費代測
檢測樣本種類：血清,，血漿，尿液,，組織勻漿,，細胞上清液，灌洗液,，糞便等樣本
廣州奧瑞達生物供應(yīng)種屬有：大鼠,，小鼠，豚鼠,，兔,，犬，猴,，豬牛羊,，雞鴨鵝，植物,，魚,，昆蟲ELISA試劑盒等
小鼠蛋白酪氨酸磷酸酶抗體 （ELISA）試劑盒試驗原理：
小鼠蛋白酪氨酸磷酸酶抗體 （ELISA）試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知待測物質(zhì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測,。先將待測物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育,。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A,、B,，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中待測物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系,。
試劑盒內(nèi)容及其配制

小鼠蛋白酪氨酸磷酸酶抗體 （ELISA）試劑盒自備材料
1）蒸餾水。
2）加樣器：5ul,、10ul,、50ul,、100ul、200ul,、500ul,、1000ul。
3）振蕩器及磁力攪拌器等,。
小鼠蛋白酪氨酸磷酸酶抗體 （ELISA）試劑盒安全性
1）避免直接接觸終止液和底物A,、B。一旦接觸到這些液體,，請盡快用水沖洗,。
2）實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品,。
3）不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
小鼠蛋白酪氨酸磷酸酶抗體 （ELISA）試劑盒操作注意事項
1）試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,，不可保存。
2）實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,，密封保存,，以免變質(zhì)。
3）不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
4）使用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A,、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6）洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
7）底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,，有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8）加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
9）按照說明書中標(biāo)明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作。

小鼠蛋白酪氨酸磷酸酶抗體 （ELISA）試劑盒樣品收集,、處理及保存方法
1）血清-----操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2）血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3）細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,，取上清液
5）保存------如果樣品不立即使用,，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠蛋白酪氨酸磷酸酶抗體 （ELISA）試劑盒試劑的準(zhǔn)備
1）標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,，不能儲存,。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。
2）洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋,。
小鼠蛋白酪氨酸磷酸酶抗體 （ELISA）試劑盒操作步驟
1）使用前,，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2）根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3）加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時,。
4）甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。
7）每孔加入底物A、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8）取出酶標(biāo)板,，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。
9）在450nm波長處測定各孔的OD值,。