小鼠過氧化氫酶 （ELISA）試劑盒

規(guī)格：96T/48T
產(chǎn)品用途：僅供科研檢測,，不得用于臨床
廣州奧瑞達生物特色服務(wù)： 免費代測
檢測樣本種類：血清，血漿,，尿液,，組織勻漿，細胞上清液,，灌洗液,，糞便等樣本
廣州奧瑞達生物供應(yīng)種屬有：大鼠，小鼠,，豚鼠,，兔，犬,，猴,，豬牛羊，雞鴨鵝,，植物,，魚，昆蟲ELISA試劑盒等
小鼠過氧化氫酶 （ELISA）試劑盒試驗原理：
小鼠過氧化氫酶 （ELISA）試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知待測物質(zhì)濃度的標準品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測,。先將待測物質(zhì)和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,，加入親和素標記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,，然后加入底物A,、B，和酶結(jié)合物同時作用,。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中待測物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系。
小鼠過氧化氫酶 （ELISA）試劑盒試劑盒內(nèi)容及其配制
小鼠過氧化氫酶 （ELISA）試劑盒自備材料
1）蒸餾水,。
2）加樣器：5ul,、10ul、50ul,、100ul,、200ul,、500ul、1000ul,。
3）振蕩器及磁力攪拌器等,。
小鼠過氧化氫酶 （ELISA）試劑盒安全性
1）避免直接接觸終止液和底物A、B,。一旦接觸到這些液體,，請盡快用水沖洗。
2）實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
3）不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
小鼠過氧化氫酶 （ELISA）試劑盒操作注意事項
1）試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,，使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存,。
2）實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存,，以免變質(zhì),。
3）不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A,、B液時,，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6）洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水,。
7）底物A應(yīng)揮發(fā),，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,，避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸，有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
8）加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
9）按照說明書中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作,。

小鼠過氧化氫酶 （ELISA）試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1）血清-----操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2）血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3）細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,，取上清液
5）保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
小鼠過氧化氫酶 （ELISA）試劑盒試劑的準備
1）標準品：標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻,。
2）洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋,。
小鼠過氧化氫酶 （ELISA）試劑盒操作步驟
1）使用前，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2）根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3）加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時,。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。
5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘,。
6）甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
7）每孔加入底物A,、B各50ul，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘,。避免光照。

8）取出酶標板,，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。

9）在450nm波長處測定各孔的OD值,。