ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒,、ELISA Kit,、酶聯(lián)免疫試劑盒,、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒,、酶免試劑盒等,,比較常見的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等,;ELISA試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測(cè),,自從60-70年代問世以來(lái),得到科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣,,尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定,、易保存,,操作簡(jiǎn)便,,結(jié)果判斷較客觀等因素,,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中,。為了保證ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,我們需要掌握一些小技巧以助于實(shí)驗(yàn)的成功,,那么ELISA試劑盒的操作技巧您知道嗎,?
ELISA試劑盒的17種操作技巧,如若您掌握了這些實(shí)驗(yàn)技巧之后,,在做ELISA實(shí)驗(yàn)中,試驗(yàn)起來(lái)會(huì)更熟練,,大大的降低了實(shí)驗(yàn)過程中的風(fēng)險(xiǎn),,ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的入門新手掌握了這些知識(shí)后,,操作起來(lái)都會(huì)快的多。
ELISA試劑盒17個(gè)相關(guān)操作技巧如下:
1.切記在加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干,。
2.合理安排檢測(cè)量,,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
3.在吸取液體時(shí),,要用量程和需要量接近的槍去吸,,減少誤差,。
4.務(wù)必做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,,又能反映出試劑盒的精密度,。
5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,。
6.為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,。
7.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請(qǐng)于2-8℃保存,。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用,。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液,。
8.ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,加樣后及時(shí)放人孵箱,,標(biāo)本較多時(shí),,要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,,難以清洗。
9.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄,。
10.人ELISA試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈,。
11.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,,只是最后加底物溶液及2N H2SO4,。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
12.手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后,。應(yīng)靜置15~30s,,不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染,。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干,。
13.對(duì)樣本的結(jié)果有疑問時(shí)需要使用其他檢測(cè)方法進(jìn)行驗(yàn)證,。
14.沒有去離子水或雙蒸水時(shí),可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,,切勿使用自來(lái)水,。
15.在使用微量加樣器時(shí),,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
16.吸取液體時(shí)速度不易太快,,以免產(chǎn)生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準(zhǔn)確,。
17.吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差,。