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當(dāng)前位置:廣州奧瑞達(dá)生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>奧瑞達(dá)生物淺談如何區(qū)分雙抗夾心法,、間接法和競爭法
近年來,,ELISA試劑盒以靈敏度較高,、特異性較好的特點(diǎn)得到了廣泛的應(yīng)用,ELISA試劑盒根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件,,又分為雙抗夾心法,、間接法、競爭法等幾種類型,。
那么,,這幾種類型分別應(yīng)用于哪些實(shí)驗(yàn)?這些類型的優(yōu)缺點(diǎn)又是什么呢,?請繼續(xù)往下看,!
雙抗體夾心法測抗原:雙抗體夾心法是檢測抗原常用的方法,,適用于測定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原,但不適用于測定半抗原及小分子單價(jià)抗原,,因其不能形成兩位點(diǎn)夾心,。
雙抗原夾心法測抗體:反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物,,以檢測相應(yīng)的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體,。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋,,可直接用于測定,因此其敏感度相對高于間接法,。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測常采用本法,。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同,,尋找合適的標(biāo)記方法,。
間接法:是檢測抗體常用的方法,本法主要用于對病原體抗體的檢測而進(jìn)行傳染病的診斷,。
競爭法測抗體:當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去,,或不易得到足夠的純化抗原時(shí),可用此法檢測特異性抗體,。其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競爭與固相抗原結(jié)合,。抗HBe的檢測一般采用此法,。
競爭法測抗原:小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn),,因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測定,可以采用競爭法模式,。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合,。標(biāo)本中抗原量含量愈多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少,,最后的顯色也愈淺,。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法,。
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