標(biāo)曲顯色過強(qiáng)無明顯梯度

1,、主要懷疑點(diǎn)：洗板不充分。

2,、機(jī)器洗版：確保機(jī)器設(shè)置的針頭能吸干孔中液體,，并且加液針頭能加液大于350ul，加液針頭沒有被異物或者結(jié)晶鹽堵住,。

3、手動(dòng)洗板,，嚴(yán)格按照步驟,，使用干凈滅菌的槍頭和加樣槽，使用無氧化劑的吸水紙,。加350ul洗液，靜置90秒,，在吸水紙上拍干孔中液體后再加入下一步洗液或者試劑。

4,、特別注意，在加入TMB前的洗板步驟極其重要,，殘留的HRP酶會(huì)直接導(dǎo)致TMB顯色,。

5,、TMB 已經(jīng)污染，檢測(cè)TMB是否透明無色,，如果偏藍(lán)就是污染了,。

6、檢查配制洗液的水是否污染,，要求使用的水是雙蒸水，三蒸水或無離子水,，水中的Fe3+,Cu3+,Co3+等過渡金屬,，以及HClO都會(huì)氧化TMB,。

7、酶標(biāo)板受潮,，長(zhǎng)霉,，或者試劑過期,。

8,、環(huán)境污染，空氣中有導(dǎo)致顯色的物質(zhì)或者粉塵,。