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Calcein,AM

產(chǎn)品貨號(hào)：C2200

儲(chǔ)存條件：-20℃,，干燥避光保存，保質(zhì)期12個(gè)月

產(chǎn)品描述

Calcein, AM 是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑,，它穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成 Calcein,，從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)，發(fā)出強(qiáng)綠色熒光,。與其它同類(lèi)試劑（如 BCECF, AM 和 CFDA）相比,，Calcein, AM 的細(xì)胞毒性很低。Calcein 的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為 490 nm 和 515 nm,。

Calcein, AM 僅對(duì)活細(xì)胞染色,。作為核染色染料的 PI 不能穿過(guò)活細(xì)胞的細(xì)胞膜，它穿過(guò)死細(xì)胞膜的無(wú)序區(qū)域而到達(dá)細(xì)胞核,，并嵌入細(xì)胞的 DNA 雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光（激發(fā)：535 nm,，發(fā)射：617 nm），因此 PI 僅對(duì)死細(xì)胞染色,。由于 Calcein 和 PI-DNA 都可被 490nm 激發(fā),，因此可用熒光顯微鏡同時(shí)觀(guān)察活細(xì)胞和死細(xì)胞。用 545 nm 激發(fā),，僅可觀(guān)察到死細(xì)胞,。根據(jù)以上特點(diǎn)，Calcein, AM 和 PI 經(jīng)常被結(jié)合用來(lái)作為活細(xì)胞和死細(xì)胞的雙重染色,。由于不同細(xì)胞系的best染色條件不同,，我們建議個(gè)別確定 Calcein, AM 和 PI 的合適濃度。

產(chǎn)品性質(zhì)

操作說(shuō)明

1）用DMSO 制備1 mM 的Calcein, AM溶液，并用PBS 將其稀釋制成1～50μM的Calcein, AM 溶液①

2）將 1/10 細(xì)胞培養(yǎng)基體積的 Calcein, AM 溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中②,。

3）在 37℃培養(yǎng)細(xì)胞 15～30 分鐘,。

4）用 PBS 或適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌細(xì)胞兩次。

5）用 490 nm 激發(fā)波長(zhǎng),，515 nm 發(fā)射波長(zhǎng)的濾光片的熒光顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞

注：如果 Calcein, AM 很難進(jìn)入細(xì)胞,，可以使用表面活性劑，如 Pluronic F127 ,。 也可以用 1/10 濃度的 Calcein, AM 溶液代替培養(yǎng)基,。

注意事項(xiàng)

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

本品僅用于實(shí)驗(yàn)研究,。