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產品貨號：DAPI01-1
儲存條件：2-8℃。常溫運輸,。粉末在室溫下穩(wěn)定,，需避光儲存。
產品描述
DAPI是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,。和雙鏈DNA結合后可以產生比DAPI自身強20多倍的熒光,。和EB(ethidium bromide)相比，對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍,。DAPI染色常用于細胞凋亡檢測,，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色,。DAPI的最da激發(fā)波長為340nm,，最da發(fā)射波長為488nm；DAPI和雙鏈DNA結合后,，最da激發(fā)波長為364nm,，最da發(fā)射波長為454nm。本DAPI溶液用水配制,，加熱有助于溶解,。
用于細胞核染色時，推薦的DAPI工作濃度為0.5-10μg/ml,。
配制母液
用雙蒸水溶解,，終濃度為1mg/ml。本產品不可以用緩沖液直接溶解,。-20℃可保存1年,，建議分裝保存，避免反復凍融,。
使用方法
1.配制工作液：用雙蒸水或PBS稀釋母液,，配制成所需要的工作的濃度（0.5-10μg/ml）。
2.固定的細胞或組織染色：
對于固定的細胞或組織樣品,，固定后,，適當洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的最后進行,。如果不需要進行其它染色,，則直接進行DAPI染色。
a)對于貼壁細胞或組織切片：加入適量DAPI染色液,，覆蓋住樣品即可,。
對于懸浮細胞：至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻,。室溫放置3-5分鐘,。
b)吸除DAPI染色液,，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,，每次3-5分鐘,。
c)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長360nm,，發(fā)射波長460nm,。
3.活細胞或組織染色：
a)細胞培養(yǎng)物中加入適量DAPI染色液，約1/10細胞培養(yǎng)基體積,，必須充分覆蓋住待染色的樣品,。通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液，對于96孔板一個孔需加入100μl染色液,。
b)在37℃培養(yǎng)細胞 10～20 分鐘,。
c)用PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。
d)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察,。激發(fā)波長360nm,，發(fā)射波長460nm。
注意事項
1)DAPI對人體有一定刺激性,，請注意適當防護,。
2)熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測,。
3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液,。
4)為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。
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