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貨物所在地:北京北京市
更新時間:2024-09-27 21:00:07
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NdeI 快速內(nèi)切酶
產(chǎn)品貨號:F5551S
儲存條件:-20℃
同裂酶:FauNDI
注:同裂酶對于不同的甲基化修飾可能具有不同敏感性,。
產(chǎn)品組成
產(chǎn)品組成 組分 | 規(guī)格 |
LabFD™ NdeI | 200ul |
10×LabFD™ Buffer | 2×1ml |
10×LabFD™ Color Buffer | 2×1ml |
產(chǎn)品簡介
LabFD™快速內(nèi)切酶是一系列經(jīng)過基因工程重組,、能夠在5~15分鐘內(nèi)精確完成DNA切割的高保真限制性內(nèi)切酶,,適用于質(zhì)粒DNA、PCR產(chǎn)物或基因組DNA等的快速酶切,。LabFD™快速內(nèi)切酶具有如下特點:5~15分鐘內(nèi)即可完成酶切,;共用一種酶切Buffer,大大簡化酶切反應(yīng)體系,;良好的酶活冗余度,,輕松應(yīng)對底物過量或困難模板酶切。此外,,LABLEAD去磷酸化,、連接試劑在LabFD™酶切Buffer中具有baifenzhibai活性,支持一管化反應(yīng),,提升“酶切-修飾-連接"的體驗,。
建議反應(yīng)條件
1×LabFD™緩沖液;
37℃溫育,;
參照“DNA快速酶切流程"配制反應(yīng)體系,。
失活條件
80℃溫育 20 min。
質(zhì)量控制
功能活性檢測
最shi反應(yīng)溫度下,,在20ul反應(yīng)體系中,,1ul LabFD™ NdeI能夠在15min內(nèi)*消化1ugλDNA。
超長時間溫育檢測
最shi反應(yīng)溫度下,,將1ul LabFD™ NdeI與1ugλDNA共同溫育3h,,未檢測到其他核酸酶污染或星號活性引起的底物非特異性降解,延時酶切可能出現(xiàn)星號活性,。
酶切-連接-再酶切檢測
最shi反應(yīng)溫度下,,使用1ul LabFD™ NdeI消化底物,回收酶切產(chǎn)物,。在22℃下使用適量Fast T4 DNA Ligase可以將酶切產(chǎn)物重新連接,。將連接產(chǎn)物再次回收后,使用相同的內(nèi)切酶可以重新切開連接產(chǎn)物,。
非特異性內(nèi)切酶活性檢測
最shi反應(yīng)溫度下,,將1ul LabFD™ NdeI與1ug超螺旋質(zhì)粒DNA共同溫育4h,使用瓊脂糖凝膠電泳檢測,,質(zhì)粒DNA仍然處于超螺旋狀態(tài),。
藍白斑檢測
將含有單一lacZα基因的載體以1ul LabFD™ NdeI消化,重新連接后轉(zhuǎn)化入大腸桿菌感受態(tài)細胞,,涂布在含有對應(yīng)抗生素,、IPTG和X-gal的LB培養(yǎng)基平板上。連接正確的產(chǎn)物會生長出藍色菌落,,而連接錯誤(即DNA末端切口不完整)的產(chǎn)物將得到白色菌落,。對于LabFD™系列限制酶而言,,白色菌落比例應(yīng)小于1%。