目錄:北京蘭博利德商貿(mào)有限公司>>蛋白研究>>WB試劑>> P0155-125 +P0155-5一步法SDS-PAGE AB液快速制膠試劑盒15%
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | P0155 |
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15% 一步法AB液蛋白快速制膠試劑盒
貨號:P0155
存儲條件:APS,-30~-15℃保存,,≤0℃運輸,,可在2~8℃保存至少3個月;其他組分,,2~8℃保存,。
產(chǎn)品簡介:
15% AB液蛋白快速制膠試劑盒適用于蛋白聚丙烯酰胺凝膠的快速制備。本試劑盒采用上層膠和下層膠的預(yù)混配方,,只需將試劑兩兩混合,,加入促凝劑即可凝膠,簡便快捷,。所配的上層膠帶有顏色,,方便點樣和區(qū)分不同凝膠。試劑盒提供的改良型促凝劑APS,,具有良好的穩(wěn)定性和促凝效果,,配膠過程中無需添加TEMED。本試劑盒可配制125塊mini PAGE膠(以 0.75 mm厚度膠計算),。
產(chǎn)品組分
組 分 | 貨號 | P0105 |
上層膠 A液 | P0155-1 | 80 ml |
上層膠 B液 | P0155-2 | 80 ml |
下層膠 A液(15%) | P0155-3 | 250 ml |
下層膠 B液 | P0155-4 | 250 ml |
APS | P0125-5 | 8 ml |
凝膠濃度選擇參照
貨號 | 試劑盒濃度 | 蛋白最佳分離范圍 |
P0065 | 6% | 50-150KD |
P0085 | 8% | 30-130KD |
P0105 | 10% | 20-100KD |
P0125 | 12% | 10-70KD |
P0155 | 15% | 10-55KD |
操作流程:
以制備一塊0.75/1.0/1.5 mm的PAGE膠為例,。
下層膠配方
凝膠厚度 | 下層膠 A液 | 下層膠 B液 | APS |
0.75mm | 2.0ml | 2.0ml | 40ul |
1.0mm | 2.7ml | 2.7ml | 60ul |
1.5mm | 4.0ml | 4.0ml | 80ul |
上層膠配方
凝膠厚度 | 上層膠 A液 | 上層膠 B液 | APS |
0.75mm | 0.5ml | 0.5ml | 10ul |
1.0mm | 0.75ml | 0.75ml | 15ul |
1.5mm | 1.0ml | 1.0ml | 20ul |
1. 各組分在使用前請顛倒混勻6-8次。
2. 下層膠配制:取等體積下層膠A液和下層膠B液,,各2.0/2.7/4.0 ml,,混勻。
3. 上層膠配制:取等體積上層膠A液和上層膠B液,,各0.5/0.75/1.0 ml,,混勻。
4. 向步驟2的混合溶液中加入40/60/80 μl的APS,,立即充分混勻,,然后注入制膠玻璃板中,,使液面距短玻璃板上沿約1.5cm,。
注1:此溶液一般過量,請勿全部注入,。
注2:混勻操作避免劇烈振蕩,,在灌注的過程中避免將氣泡灌入制膠玻璃板中。
注3:灌注下層膠后用ddH2O或醇封閉,,待下層膠凝固后再灌注上層膠,。
5. 向步驟3的混合溶液中加入10/15/20μl的APS,,立即充分混勻,無需等待下層膠凝固,,即可將混勻后的溶液輕緩注入制膠玻璃板中,,輕輕插入梳齒。
注:灌注上層膠溶液可沿著長玻璃板輕緩注入,,避免將下層膠沖散,。
6. 待膠凝固后(室溫約20-30 min),拔去梳齒即可用于電泳,。
注:請盡量使用新鮮配制的電泳緩沖液,。