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參考價 | 175 |
參考價:¥ 175
500ml
500ml | 175元 | 999ml可售 |
更新時間:2023-11-26 20:17:38瀏覽次數(shù):299評價
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 食品/農(nóng)產(chǎn)品,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
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4XSDS分離膠緩沖液(pH8.8)
產(chǎn)品貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
S4880 | 4XSDS分離膠緩沖液(pH8.8) | 100ml,500ml |
保存:4℃。
產(chǎn)品說明:
本試劑為配制SDS-PAGE分離膠緩沖液,,可用于配制各種濃度的變性PAGE凝膠,,方便,、快捷。產(chǎn)品中已加入10%SDS,,使用時不用另外加入,。
操作步驟(僅供參考):
根據(jù)目的蛋白分子量大小選擇合適的PAGE分離膠配制濃度,最佳膠濃度請參考附表,。
灌制分離膠(各試劑使用量請參考附表)
1,、參照凝膠模具說明書,裝配好凝膠模具,。
2,、將不同體積的30%丙烯酰胺/甲叉29:1 、分離膠緩沖液和蒸餾水在小燒杯或試管中混合,。
3,、加入10%APS和TEMED,輕輕攪拌使其混勻,,避免產(chǎn)生氣泡,。
4、在凝膠模具中灌入適量分離膠溶液(對于mini-gel,,凝膠液加至約距前玻璃板頂端 1.5 cm或距梳齒約0.5cm即可),。
5、靜置,,待分離膠和水層之間出現(xiàn)一個清晰的界面后,表面凝膠已聚合,。
灌制濃縮膠
1,、小心傾倒出覆蓋在分離膠上的水層。
2,、將不同體積的30%丙烯酰胺/甲叉29:1 ,、分離膠緩沖液和蒸餾水在一個小燒杯或試管中混 合。
3,、加入10%APS和TEMED,,輕輕攪拌使其混勻,避免產(chǎn)生氣泡,。
4,、將濃縮膠溶液加至分離膠的上面,直至凝膠溶液到達(dá)前玻璃板的頂端,。
5,、將梳子插入凝膠內(nèi),避免產(chǎn)生氣泡,。
6,、靜置,,等待濃縮膠聚合。
7,、待凝膠聚合后,,小心地拔出梳子,以免破壞加樣孔,。
進(jìn)行常規(guī)電泳操作,。
注意:
TEMED和10%過硫酸銨溶液最后加,在加入之前需混勻前面所加試劑,。10%過硫酸銨在4度有限期為一周,,TEMED容易揮發(fā),使用后請蓋緊瓶蓋,。在常溫下膠30分鐘內(nèi)可以凝固,,如溫度過低,可放37度溫箱凝固,。灌完分離膠后,,輕輕的加1ml ddH2O封上層,凝固后可見到分界線,。灌濃縮膠時先傾去水層,。灌濃縮膠后立刻插入梳子。濃縮膠凝固后,,放入電泳液中(讓電泳液漫過加樣孔),,輕輕拔出梳子。
附表:
根據(jù)目的蛋白的分子量大小選擇合適的凝膠濃度,,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分離膠.
分離膠濃度 | 最佳分離范圍 |
6%膠 | 50-150kD |
8%膠 | 30-90kD |
10%膠 | 20-80kD |
12%膠 | 12-60kD |
15%膠 | 10-40kD |
關(guān)于SDS-PAGE膠的配制,,請參考
試劑 | 分離膠6% | 分離膠8% | 分離膠10% | 分離膠12% | 濃縮膠4% |
配制量 | 10ml | 10ml | 10ml | 10ml | 5ml |
30%丙烯酰胺 | 2.0ml | 2.7ml | 3.3ml | 4.0ml | 0.67ml |
4×分離膠緩沖液 | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | — |
4×濃縮膠緩沖液 | --- | — | — | — | 1.25ml |
ddH2O | 5.4ml | 4.7ml | 4.1ml | 3.4ml | 3.025ml |
TEMED | 10ul | 10ul | 10ul | 10ul | 5ul |
10%過硫酸銨 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 50ul |
相關(guān)產(chǎn)品:
30%丙烯酰胺/甲叉 29:1 | 貨號A3291 |
10XTris-gan氨酸-SDS電泳緩沖液 | 貨號T7777 |
4 X SDS蛋白上樣緩沖液 | 貨號G2526 |
4 X SDS 濃縮膠緩沖液 | 貨號S4680 |
4 X SDS 分離膠緩沖液 | 貨號S4880 |
1.5M Tris-HCl(pH8.8) | 貨號T1088 |
1M TrisT-HCl (pH6.8) | 貨號T1068 |
考馬斯亮藍(lán)染色液 | 貨號G1042 |
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