目錄:北京蘭博利德商貿(mào)有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>內(nèi)切酶>> F5510S-500rxns快速內(nèi)切酶BamHI
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500rxns |
|---|---|---|---|
| 貨號 | F5510S | 儲存條件 | -20℃ |
BamHI限制性內(nèi)切酶
產(chǎn)品貨號：F5510S
儲存條件：-20℃
產(chǎn)品組成
| 組分 | 規(guī)格 |
| LabFD™ BamHI | 500ul |
| 10×LabFD™ Buffer | 3×1ml |
| 10×LabFD™ Color Buffer | 3×1ml |
產(chǎn)品簡介
LabFD™快速內(nèi)切酶是一系列經(jīng)過基因工程重組,、能夠在5~15分鐘內(nèi)精確完成DNA切割的高保真限制性內(nèi)切酶，適用于質(zhì)粒DNA,、PCR產(chǎn)物或基因組DNA等的快速酶切,。LabFD™快速內(nèi)切酶具有如下特點：5~15分鐘內(nèi)即可完成酶切；共用一種酶切Buffer,，大大簡化酶切反應(yīng)體系,；良好的酶活冗余度，輕松應(yīng)對底物過量或困難模板酶切,。此外,，LABLEAD去磷酸化、連接試劑在LabFD™酶切Buffer中具有baifenzhibai活性,，支持一管化反應(yīng),，提升“酶切-修飾-連接”的體驗。
建議反應(yīng)條件
1×LabFD™緩沖液,；
37℃溫育,；
參照“DNA快速酶切流程”配制反應(yīng)體系。
失活條件
不可熱失活,，請使用酚氯仿抽提或柱純化,。
質(zhì)量控制
功能活性檢測
最shi反應(yīng)溫度下，在20ul反應(yīng)體系中,，1ulLabFD™ BamHI能夠在15min內(nèi)*消化1ugλDNA,。
超長時間溫育檢測
最shi反應(yīng)溫度下，將1ul LabFD™ BamHI與1ugλDNA共同溫育3h,，未檢測到其他核酸酶污染或星號活性引起的底物非特異性降解,，延時酶切可能出現(xiàn)星號活性。
酶切-連接-再酶切檢測
最shi反應(yīng)溫度下,，使用1ul LabFD™ BamHI消化底物,，回收酶切產(chǎn)物,。在22℃下使用適量Fast T4 DNA Ligase可以將酶切產(chǎn)物重新連接。將連接產(chǎn)物再次回收后,，使用相同的內(nèi)切酶可以重新切開連接產(chǎn)物,。
非特異性內(nèi)切酶活性檢測
最shi反應(yīng)溫度下，將1ul LabFD™ BamHI與1ug超螺旋質(zhì)粒DNA共同溫育4h,，使用瓊脂糖凝膠電泳檢測,，質(zhì)粒DNA仍然處于超螺旋狀態(tài)。
藍白斑檢測
將含有單一lacZα基因的載體以1ul LabFD™ BamHI消化,，重新連接后轉(zhuǎn)化入大腸桿菌感受態(tài)細胞,，涂布在含有對應(yīng)抗生素、IPTG和X-gal的LB培養(yǎng)基平板上,。連接正確的產(chǎn)物會生長出藍色菌落,，而連接錯誤（即DNA末端切口不完整）的產(chǎn)物將得到白色菌落。對于LabFD™系列限制酶而言,，白色菌落比例應(yīng)小于1%,。
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