目錄:北京蘭博利德商貿(mào)有限公司>>分子生物學試劑>>內(nèi)切酶>> 快速內(nèi)切酶PstI
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | F5561S |
|---|---|---|---|
| 儲存條件 | -20℃ |
產(chǎn)品貨號：F5561S
儲存條件：-20℃
產(chǎn)品組成
組分 | 規(guī)格 |
LabFD™ PstI | 500ul |
10×LabFD™ Buffer | 3×1ml |
10×LabFD™ Color Buffer | 3×1ml |
產(chǎn)品簡介
LabFD™快速內(nèi)切酶是一系列經(jīng)過基因工程重組、能夠在5~15 分鐘內(nèi)精確完成 DNA 切割的高保真限制性內(nèi)切酶,，適用于質(zhì)粒 DNA,、PCR 產(chǎn)物或基因組 DNA 等的快速酶切。LabFD™ 快速內(nèi)切酶具有如下特點：5~15 分鐘內(nèi)即可完成酶切,；共用一種酶切Buffer,，大大簡化酶切反應體系；良好的酶活冗余度,，輕松應對底物過量或困難模板酶切,。此外，LABLEAD去磷酸化,、連接試劑在LabFD™酶切Buffer 中具有baifenzhibai活性,，支持一管化反應，提升“酶切-修飾-連接"的體驗,。
建議的反應條件：
1× LabFD™緩沖液,；
37℃溫育；
參照“DNA快速酶切流程"配制反應體系,。
失活條件
不可熱失活,，請使用酚氯仿抽提或柱純化,。
質(zhì)量控制
功能活性檢測
最shi反應溫度下，在20ul反應體系中,，1ul LabFD™ PstI能夠在15min 內(nèi)*消化1ug λDNA,。
超長時間溫育檢測
最shi反應溫度下,，將1ul LabFD™ PstI 與 1ugλDNA共同溫育3h,，未檢測到其他核酸酶污染或星號活性引起的底物非特異性降解，延時酶切可能出現(xiàn)星號活性,。
酶切-連接-再酶切檢測
最shi反應溫度下,，使用 1ul LabFD™ PstI消化底物，回收酶切產(chǎn)物,。在22℃下使用適量Fast T4 DNA Ligase可以將酶切產(chǎn)物重新連接,。將連接產(chǎn)物再次回收后，使用相同的內(nèi)切酶可以重新切開連接產(chǎn)物,。
將含有單一lacZα基因的載體以1ul LabFD™ PstI消化,，重新連接后轉化入大腸桿菌感受態(tài)細胞，涂布在含有對應抗生素,、IPTG和X-gal的LB培養(yǎng)基平板上,。連接正確的產(chǎn)物會生長出藍色菌落，而連接錯誤（即DNA末端切口不完整）的產(chǎn)物將得到白色菌落,。對于LabFD™系列限制酶而言,，白色菌落比例應小于1%。
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