目錄:北京蘭博利德商貿有限公司>>分子生物學試劑>>內切酶>> 快速內切酶SalI
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | F5572S |
|---|---|---|---|
| 儲存條件 | -20℃ |
產品貨號：F5566S
儲存條件：-20℃
產品組成
組分 | 規(guī)格 |
LabFD™ SalI | 200ul |
10×LabFD™ Buffer | 2×1ml |
10× LabFD™ Color Buffer | 2×1ml |
產品簡介
LabFD™快速內切酶是一系列經過基因工程重組,、能夠在5~15分鐘內精確完成DNA切割的高保真限制性內切酶,，適用于質粒DNA、PCR產物或基因組DNA等的快速酶切,。LabFD™快速內切酶具有如下特點：5~15分鐘內即可完成酶切,；共用一種酶切Buffer，大大簡化酶切反應體系,；良好的酶活冗余度,，輕松應對底物過量或困難模板酶切。此外,，LABLEAD去磷酸化,、連接試劑在LabFD™酶切Buffer中具有baifenzhibai活性，支持一管化反應,，提升“酶切-修飾-連接"的體驗,。
建議反應條件
1×LabFD™緩沖液；
37℃溫育,；
參照“DNA快速酶切流程"配制反應體系,。
失活條件
80℃溫育 20 min。
質量控制
功能活性檢測
最shi反應溫度下,，在20ul反應體系中,，1ul LabFD™ SalI能夠在15min內*消化1ugλDNA (HindIII digest),。
超長時間溫育檢測
最shi反應溫度下，將1ul LabFD™ SalI與1ugλDNA (HindIII digest)共同溫育3h,，未檢測到其他核酸酶污染或星號活性引起的底物非特異性降解,，延時酶切可能出現(xiàn)星號活性。
酶切-連接-再酶切檢測
最shi反應溫度下,，使用1ul LabFD™ SalI消化底物,，回收酶切產物。在22℃下使用適量Fast T4 DNA Ligase可以將酶切產物重新連接,。將連接產物再次回收后,，使用相同的內切酶可以重新切開連接產物。
非特異性內切酶活性檢測
最shi反應溫度下,，將1ul LabFD™ SalI與1ug超螺旋質粒DNA共同溫育4h,，使用瓊脂糖凝膠電泳檢測，質粒DNA仍然處于超螺旋狀態(tài),。
藍白斑檢測
將含有單一lacZα基因的載體以1ul LabFD™ SalI消化,，重新連接后轉化入大腸桿菌感受態(tài)細胞，涂布在含有對應抗生素,、IPTG和X-gal的LB培養(yǎng)基平板上,。連接正確的產物會生長出藍色菌落，而連接錯誤（即DNA末端切口不完整）的產物將得到白色菌落,。對于LabFD™系列限制酶而言,，白色菌落比例應小于1%,。
4
化工儀器網