目錄:北京蘭博利德商貿有限公司>>分子生物學試劑>>內切酶>> 快速內切酶SbfI
| 供貨周期 | 現貨 | 貨號 | F5568S |
|---|---|---|---|
| 儲存條件 | -20℃ |
產品貨號：F5568s
儲存條件：-20℃
同裂酶：SdaI, Sse8387I
注：同裂酶對于不同的甲基化修飾也許具有不同敏感性,。
產品組成
組分 | 規(guī)格 |
LabFD™ SbfI | 25ul |
10×LabFD™ Buffer | 1ml |
10×LabFD™ Color Buffer | 1ml |
產品簡介
LabFD™快速內切酶是一系列經過基因工程重組,、能夠在5~15分鐘內精確完成DNA切割的高保真限制性內切酶，適用于質粒DNA,、PCR產物或基因組DNA等的快速酶切,。LabFD™快速內切酶具有如下特點：5~15分鐘內即可完成酶切；共用一種酶切Buffer,，大大簡化酶切反應體系,；良好的酶活冗余度，輕松應對底物過量或困難模板酶切,。此外,，LABLEAD去磷酸化、連接試劑在LabFD™酶切Buffer中具有baifenzhibai活性,，支持一管化反應,，提升“酶切-修飾-連接"的體驗。
建議反應條件
1×LabFD™緩沖液,；
37℃溫育,；
參照“DNA快速酶切流程"配制反應體系。
失活條件
80℃溫育20min,。
質量控制
功能活性檢測
最shi反應溫度下,，在20ul反應體系中,，1ul LabFD™ SbfI能夠在15min內*消化1ug λDNA。
超長時間溫育檢測
最shi反應溫度下,，將1ul LabFD™ SbfI與1ugλDNA共同溫育3h,，未檢測到其他核酸酶污染或星號活性引起的底物非特異性降解，延時酶切可能出現星號活性,。
酶切-連接-再酶切檢測
最shi反應溫度下,，使用1ul LabFD™ SbfI消化底物，回收酶切產物,。在22℃下使用適量Fast T4 DNA Ligase可以將酶切產物重新連接,。將連接產物再次回收后，使用相同的內切酶可以重新切開連接產物,。
非特異性內切酶活性檢測
最shi反應溫度下,，將1ul LabFD™ SbfI與1ug超螺旋質粒DNA共同溫育4h，使用瓊脂糖凝膠電泳檢測,，質粒DNA仍然處于超螺旋狀態(tài),。
藍白斑檢測
將含有單一lacZα基因的載體以1ul LabFD™ SbfI消化，重新連接后轉化入大腸桿菌感受態(tài)細胞,，涂布在含有對應抗生素,、IPTG和 X-gal的LB培養(yǎng)基平板上。連接正確的產物會生長出藍色菌落,，而連接錯誤（即DNA末端切口不完整）的產物將得到白色菌落,。對于 LabFD™ 系列限制酶而言，白色菌落比例應小于1%,。
4
化工儀器網