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代謝分析儀在細(xì)胞克隆中的應(yīng)用

時(shí)間:2022-10-19 閱讀:204
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  代謝分析儀是一種用于化學(xué),、生物學(xué),、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué),、藥學(xué)領(lǐng)域的分析儀器,細(xì)胞株構(gòu)建是CMC的一步,,也是關(guān)鍵一步,。“好”的細(xì)胞株,可以加快工藝開(kāi)發(fā)的過(guò)程,。對(duì)于細(xì)胞克隆的篩選和評(píng)價(jià),,傳統(tǒng)的依據(jù)主要是細(xì)胞的狀態(tài)和蛋白表達(dá)量。通過(guò)對(duì)細(xì)胞功能的分析,,可以對(duì)克隆做更全面的評(píng)價(jià)和篩選,,制定細(xì)胞庫(kù)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn),還可以早期預(yù)測(cè)細(xì)胞株的表現(xiàn),,縮短克隆穩(wěn)定性評(píng)價(jià)的周期,。
 
  代謝分析儀可用于細(xì)胞克隆:
 
  通常需要進(jìn)行14天搖瓶批培養(yǎng)對(duì)CHO細(xì)胞株表現(xiàn)進(jìn)行評(píng)價(jià),。此案例根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)密度將不同CHO細(xì)胞亞克隆分為三個(gè)低、中,、高表現(xiàn)組,,從圖1中可以看到,三組細(xì)胞在培養(yǎng)后7天的生長(zhǎng)密度存在明顯差異,。與批培養(yǎng)通常需要14天相比,,只需要7天就可以對(duì)細(xì)胞亞克隆進(jìn)行評(píng)價(jià),所用時(shí)間大大縮短,。三組細(xì)胞在第7天的結(jié)果存在明顯差異,,高表現(xiàn)組克隆的線(xiàn)粒體呼吸水平明顯優(yōu)于其他兩組。所以通過(guò)的功能評(píng)價(jià)可以對(duì)CHO細(xì)胞株做更全面的分析,,也可以早期預(yù)測(cè)CHO細(xì)胞的表現(xiàn),,縮短CHO細(xì)胞克隆篩選的時(shí)間。
 
  溶氧是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵參數(shù)之一,,此案例溶氧壓力測(cè)試系統(tǒng)研究了在不同溶氧條件下CHO細(xì)胞的表現(xiàn),。不同溶氧條件下培養(yǎng)14天,細(xì)胞密度和活率的變化曲線(xiàn),。在100%溶氧條件下,,第11天開(kāi)始CHO細(xì)胞密度和活率開(kāi)始明顯降低;在175%溶氧條件下,,第7天開(kāi)始CHO細(xì)胞密度和活率開(kāi)始明顯降低,。在不同溶氧條件下的細(xì)胞功能表現(xiàn)與細(xì)胞密度和活率數(shù)據(jù)一致,需要評(píng)估的時(shí)間縮短,,與傳統(tǒng)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)結(jié)合可以更深入全面的對(duì)培養(yǎng)條件進(jìn)行評(píng)價(jià),。

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