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代謝分析儀在細胞克隆中的應用
代謝分析儀是一種用于化學,、生物學,、基礎醫(yī)學、藥學領域的分析儀器,,細胞株構建是CMC的一步,,也是關鍵一步。“好”的細胞株,,可以加快工藝開發(fā)的過程,。對于細胞克隆的篩選和評價,,傳統(tǒng)的依據(jù)主要是細胞的狀態(tài)和蛋白表達量。通過對細胞功能的分析,,可以對克隆做更全面的評價和篩選,,制定細胞庫評判標準,還可以早期預測細胞株的表現(xiàn),,縮短克隆穩(wěn)定性評價的周期,。
代謝分析儀可用于細胞克隆:
通常需要進行14天搖瓶批培養(yǎng)對CHO細胞株表現(xiàn)進行評價,。此案例根據(jù)細胞生長密度將不同CHO細胞亞克隆分為三個低,、中、高表現(xiàn)組,,從圖1中可以看到,,三組細胞在培養(yǎng)后7天的生長密度存在明顯差異。與批培養(yǎng)通常需要14天相比,,只需要7天就可以對細胞亞克隆進行評價,,所用時間大大縮短。三組細胞在第7天的結果存在明顯差異,,高表現(xiàn)組克隆的線粒體呼吸水平明顯優(yōu)于其他兩組,。所以通過的功能評價可以對CHO細胞株做更全面的分析,也可以早期預測CHO細胞的表現(xiàn),,縮短CHO細胞克隆篩選的時間,。
溶氧是細胞培養(yǎng)的關鍵參數(shù)之一,此案例溶氧壓力測試系統(tǒng)研究了在不同溶氧條件下CHO細胞的表現(xiàn),。不同溶氧條件下培養(yǎng)14天,,細胞密度和活率的變化曲線。在100%溶氧條件下,,第11天開始CHO細胞密度和活率開始明顯降低,;在175%溶氧條件下,第7天開始CHO細胞密度和活率開始明顯降低,。在不同溶氧條件下的細胞功能表現(xiàn)與細胞密度和活率數(shù)據(jù)一致,,需要評估的時間縮短,與傳統(tǒng)監(jiān)測數(shù)據(jù)結合可以更深入全面的對培養(yǎng)條件進行評價,。