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代謝分析儀在細(xì)胞克隆中的應(yīng)用

時間:2022-10-19 閱讀:176
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  代謝分析儀是一種用于化學(xué),、生物學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué),、藥學(xué)領(lǐng)域的分析儀器,,細(xì)胞株構(gòu)建是CMC的一步,也是關(guān)鍵一步,。“好”的細(xì)胞株,,可以加快工藝開發(fā)的過程。對于細(xì)胞克隆的篩選和評價,,傳統(tǒng)的依據(jù)主要是細(xì)胞的狀態(tài)和蛋白表達(dá)量,。通過對細(xì)胞功能的分析,可以對克隆做更全面的評價和篩選,,制定細(xì)胞庫評判標(biāo)準(zhǔn),,還可以早期預(yù)測細(xì)胞株的表現(xiàn),縮短克隆穩(wěn)定性評價的周期,。
 
  代謝分析儀可用于細(xì)胞克?。?br /> 
  通常需要進(jìn)行14天搖瓶批培養(yǎng)對CHO細(xì)胞株表現(xiàn)進(jìn)行評價。此案例根據(jù)細(xì)胞生長密度將不同CHO細(xì)胞亞克隆分為三個低,、中,、高表現(xiàn)組,從圖1中可以看到,,三組細(xì)胞在培養(yǎng)后7天的生長密度存在明顯差異,。與批培養(yǎng)通常需要14天相比,只需要7天就可以對細(xì)胞亞克隆進(jìn)行評價,,所用時間大大縮短,。三組細(xì)胞在第7天的結(jié)果存在明顯差異,高表現(xiàn)組克隆的線粒體呼吸水平明顯優(yōu)于其他兩組,。所以通過的功能評價可以對CHO細(xì)胞株做更全面的分析,,也可以早期預(yù)測CHO細(xì)胞的表現(xiàn),縮短CHO細(xì)胞克隆篩選的時間,。
 
  溶氧是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵參數(shù)之一,,此案例溶氧壓力測試系統(tǒng)研究了在不同溶氧條件下CHO細(xì)胞的表現(xiàn)。不同溶氧條件下培養(yǎng)14天,,細(xì)胞密度和活率的變化曲線,。在100%溶氧條件下,第11天開始CHO細(xì)胞密度和活率開始明顯降低,;在175%溶氧條件下,,第7天開始CHO細(xì)胞密度和活率開始明顯降低,。在不同溶氧條件下的細(xì)胞功能表現(xiàn)與細(xì)胞密度和活率數(shù)據(jù)一致,需要評估的時間縮短,,與傳統(tǒng)監(jiān)測數(shù)據(jù)結(jié)合可以更深入全面的對培養(yǎng)條件進(jìn)行評價,。

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