微流控化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)
一、微流控分析儀
微流控分析儀的尺寸為30cm×30cm×30cm,,重量約為10kg,。該儀器可以在一次運(yùn)行中安裝五個(gè)微流控芯片,允許同時(shí)執(zhí)行五個(gè)測(cè)試,。分析儀包含溫度控制,、磁驅(qū)動(dòng)、機(jī)械運(yùn)動(dòng)和光學(xué)檢測(cè)模塊,。①溫度控制模塊:將微流控芯片所處環(huán)境溫度恒定保持在37℃,,確保抗原抗體結(jié)合效率,;②磁驅(qū)動(dòng)和機(jī)械運(yùn)動(dòng)模塊:通過(guò)程序化移動(dòng)磁柱(magnet column)來(lái)控制磁珠(magnetic beads)的狀態(tài),;③光學(xué)檢測(cè)模塊:使用光電倍增管(PMT)檢測(cè)酶致發(fā)光反應(yīng)產(chǎn)生的化學(xué)發(fā)光信號(hào)。為避免外部光源對(duì)化學(xué)發(fā)光信號(hào)的干擾,,整個(gè)反應(yīng)在全封閉環(huán)境中運(yùn)行,。當(dāng)反應(yīng)完成后,PMT依次獲取五個(gè)芯片的化學(xué)發(fā)光信號(hào),,曝光時(shí)間為100ms,,信號(hào)強(qiáng)度由儀器軟件直接讀出。
二,、微流控芯片
微流控芯片是由芯片主體(注塑工藝,黑色聚碳酸酯)和頂蓋(3D打印工藝,,光敏樹(shù)脂)構(gòu)成,。芯片本體(110mm×15mm×5mm)包含5個(gè)微腔,每個(gè)微腔間有0.5mm寬的微縫,。微流控芯片頂蓋設(shè)計(jì)有三個(gè)孔,,從前到后依次是樣品裝載孔、排氣孔和注射孔,,頂蓋底部設(shè)計(jì)有四個(gè)插入微縫的塞子(圖2),。在頂蓋與芯片主體組裝之前,頂蓋內(nèi)表面需涂覆一層納米保護(hù)溶液,。頂蓋位置移動(dòng)可以改變微縫的開(kāi)與關(guān),,該芯片共支持三種位置變化(圖3),這三個(gè)位置分別適用于裝油,、試劑儲(chǔ)存/轉(zhuǎn)運(yùn)和化學(xué)發(fā)光免疫分析,。
圖2 微流控芯片由芯片本體(黑色)和頂蓋(白色)組成
圖3 頂蓋的三個(gè)位置狀態(tài)(頂蓋位置移動(dòng)可改變微縫的開(kāi)與關(guān))
微流控化學(xué)發(fā)光免疫分析操作步驟
圖4 微流控芯片中試劑的預(yù)存儲(chǔ)
圖5 微流控化學(xué)發(fā)光免疫分析的工作流程
磁柱上升,,磁珠激活,;磁柱下降,磁珠失活,。在每個(gè)步驟中,,當(dāng)磁珠進(jìn)入液滴時(shí),磁柱下降,,使磁珠失活,。同時(shí),微流控芯片承載平臺(tái)來(lái)回移動(dòng),,通過(guò)液滴攪拌促進(jìn)磁珠與試劑的相互作用(圖6),。
圖6 磁驅(qū)動(dòng)液滴操控
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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