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DTT（二硫蘇糖醇）的作用

時間：2023/1/31閱讀：3643
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DTT（二硫蘇糖醇）的作用

         DTT即DL-Dithiothreitol,，中文名為二硫蘇糖醇。分子式為C4H10O2S2,，分子量為154.25,，。常用還原劑,，有抗氧化作用,。DTT和巰基乙醇相比，作用相似,，但DTT的刺激性氣味要小很多,，毒性也比巰基乙醇低很多。而且DTT比巰基乙醇的濃度低7倍時,，兩者效果相近,。

DTT的特性：
        DTT是一種很強(qiáng)的還原劑，其還原性很大程度上是由于其氧化狀態(tài)六元環(huán)（含二硫鍵）的構(gòu)象穩(wěn)定性,。它的氧化還原電勢在pH為7時為-0.33伏,。
        由于容易被空氣氧化,，因此DTT的穩(wěn)定性較差；但冷凍保存或在惰性氣體中處理能夠延長它的使用壽命,。由于質(zhì)子化的硫的親核性較低,，隨著pH值的降低，DTT的有效還原性也隨之降低,；而Tris(2-carboxyethyl)phosphine HCl（TCEP鹽酸鹽）可以作為低pH值條件下DTT的替代品,，而且也比DTT更為穩(wěn)定。
1mol/L二硫蘇糖醇（DTT）溶液配制方法：
        用20ml 0.01mol/L乙酸鈉溶液（pH5.2）溶解3.09g DTT,，過濾除菌后分裝成1ml小份貯存于-20℃,。
【注意】DTT或含有DTT的溶液不能進(jìn)行高壓處理。
DTT的作用：
         DTT的用途之一是作為巰基化DNA的還原劑和去保護(hù)劑,。巰基化DNA末端硫原子在溶液中趨向于形成二聚體,，特別是在存在氧氣的情況下。這種二聚化大大降低了一些偶聯(lián)反應(yīng)實驗（如DNA在生物感應(yīng)器中的固定）的效率,；而在DNA溶液中加入DTT,，反應(yīng)一段時間后除去，就可以降低DNA的二聚化,。
        DTT也常常被用于蛋白質(zhì)中二硫鍵的還原,，可用于阻止蛋白質(zhì)中的半胱氨酸之間所形成的蛋白質(zhì)分子內(nèi)或分子間二硫鍵。但DTT往往無法還原包埋于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)內(nèi)部（溶劑不可及）的二硫鍵,，這類二硫鍵的還原常常需要先將蛋白質(zhì)變性（高溫加熱或加入變性劑,，如6M鹽酸胍、8M尿素或1%SDS）,。反之,，根據(jù)DTT存在情況下，二硫鍵還原速度的不同,，可以判斷其包埋程度的深淺,。


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