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小鼠偽狂犬病毒elisa試劑盒?樣本處理及要求

時(shí)間:2022/10/12閱讀:1043
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  小鼠偽狂犬病毒elisa試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法,。用抗體包被于酶標(biāo)板上,,實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的抗原會(huì)與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去,。依次加入生物素化的抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素,。抗體與結(jié)合在包被抗體上的抗原結(jié)合,、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),,TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測(cè)OD值,,抗原濃度與OD450值之間呈正比,,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中指標(biāo)的濃度。
 
  

小鼠偽狂犬病毒elisa試劑盒?
 

 

  小鼠偽狂犬病毒elisa試劑盒?樣本處理及要求:
  
  1,、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心。
  
  2,、血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心,。
  
  3,、尿液:用無菌管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照實(shí)行,。
  
  4、細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
  
  5,、組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量,。加入一定量的PBS,,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),,其余冷凍備用,。
  
  6、小鼠偽狂犬病毒elisa試劑盒?樣本處理及要求標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
  
  7、不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
  

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