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小鼠偽狂犬病毒elisa試劑盒?樣本處理及要求

時間:2022/10/12閱讀:953
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  小鼠偽狂犬病毒elisa試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法,。用抗體包被于酶標板上,,實驗時樣品或標準品中的抗原會與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去,。依次加入生物素化的抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素,。抗體與結(jié)合在包被抗體上的抗原結(jié)合,、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復合物,,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),,TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色,,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,,抗原濃度與OD450值之間呈正比,,通過繪制標準曲線計算出樣品中指標的濃度。
 
  

小鼠偽狂犬病毒elisa試劑盒?
 

 

  小鼠偽狂犬病毒elisa試劑盒?樣本處理及要求:
  
  1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心,。
  
  2、血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)該再次離心。
  
  3,、尿液:用無菌管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照實行,。
  
  4、細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時,,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
  
  5,、組織標本:切割標本后,稱取重量,。加入一定量的PBS,,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用,。
  
  6,、小鼠偽狂犬病毒elisa試劑盒?樣本處理及要求標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復凍融,。
  
  7、不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
  

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