產(chǎn)氣莢膜梭菌PCR檢測試劑盒
品牌：白益
貨號：BY-P9500
規(guī)格：50T

產(chǎn)氣莢膜梭菌PCR檢測試劑盒用途：科研實驗專用,，不得用于臨床診斷,，請按說明書嚴格操作

使用方法：

1. 注意：由于標準品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）,。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照,。

2. 標記6個離心管,，分別為7，6,，5,，4，3,，2,。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）,。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。

5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),，充分震蕩1分鐘,，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。

6. 換槍頭,，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用,。

樣品DNA的制備：

1. 如果有N個樣品,，必須設(shè)置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照）,，一個是NC（樣品制備陰性對照）,。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL,，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL,，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC,。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,，則PC和NC的體積也必須是200μL,。

2. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒兼容,。

設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系,，在樣品制備室進行）：

1. 如果只做1次重復(fù)，則標記N+9個PCR管,，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復(fù),，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

2. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
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