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當(dāng)前位置:上海白益生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>ELISA試劑盒實踐過程中的一些技巧
ELISA試劑盒實驗看似簡單,,其實不然。記得以前一個同學(xué)*次做ELISA實驗,,跟我說,,ELISA實驗簡直太簡單了,到第2次在次做ELISA實驗的時候,,他驚訝了,,說結(jié)果差別怎么這么大(同一份標(biāo)本),第三次的時候,,他決定認(rèn)真的做一次,,爭取做到同一份標(biāo)本,這次讓他感受到ELISA并不是那么簡單,發(fā)覺其實挺難的,。今天的文章中為大家講述一些ELISA實驗中的小技巧,,希望對大家有所幫助!
1.操作前應(yīng)對實驗的物理參數(shù)有充分的了解,,如環(huán)境溫度(保持在18C~25℃),、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數(shù)等,,要先查看水育箱溫度,,ELISA試劑盒是否符合要求。
2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,,避免刮擦包被板底部,。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,,加樣器吸頭要清洗干凈,,避免污染,加樣次序要與說明書一致,,否則可導(dǎo)致結(jié)果錯誤,,實驗重復(fù)性差。
3.手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,,洗滌次數(shù)不要超過說明書推薦的洗滌次數(shù),,洗液在反應(yīng)孑L內(nèi)滯留的時間不宜太長。不要使洗液在孑L間竄流,,造成孔問污染,,導(dǎo)致假陰性或假陽性。
4.要保證加液量一致ELISA試劑盒我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,,滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn),,造成顯色不統(tǒng)一,判斷錯誤,。
5.顯色液量不可過多加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,,加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),顯色液量不能過多,,以免顯色過強(qiáng),。
ELISA試劑盒的影響因素應(yīng)選用有國家批準(zhǔn)文號,質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品,,不能圖便宜,,忽視質(zhì)量保證。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi),,在使用時先平衡至室溫,,不同批號的試劑組分不宜交叉使用,。試劑開啟后要在一周內(nèi)用完,剩余的試劑下次用時應(yīng)先檢查是否變質(zhì),,顯色劑如被污染變色將造成全部顯色,,導(dǎo)致錯誤結(jié)果。
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