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1.實驗前將所有試劑平衡至室溫,,包括樣本、TMB(非常重要),。
2.強(qiáng)烈建議老師在操作的時候每個樣本包括標(biāo)準(zhǔn)品做復(fù)孔(請務(wù)必這樣操作),,因為這樣可以:求平均值,確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性對試劑盒的性能進(jìn)行評估 對自己的操作進(jìn)行評估解決跳孔
3.為保證老師 ELISA 實驗結(jié)果準(zhǔn)確 ,,其中幾點重要的操作注意事項請務(wù)必參考:如果以下表述與說明書中不一致,,請按照實驗對應(yīng)說明書的要求操作 。
1)標(biāo)準(zhǔn)品溶解:標(biāo)準(zhǔn)品溶解嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作,,建議老師進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時,,在EP管中進(jìn)行。
2)孵育:說明書中進(jìn)行孵育的時候,,一定要用微孔板振蕩器振蕩,,這個很重要,利于抗原抗體充分結(jié)合,。
3)洗板:建議按照說明書操作,,每次洗滌至少洗液浸泡30s,重復(fù)6次,,洗板時間太短,、次數(shù)太少會導(dǎo)致實驗效果不佳,延長洗板時間和增加洗板次數(shù)可以使背景更干凈,。
4)如何控制標(biāo)曲顯色(僅針對雙抗夾心法ELISA試劑盒)5 .30分鐘顯色時間為經(jīng)驗范圍,,每個具體的實驗,可根據(jù)以下情況,,確定大致的顯色時間:
①肉眼觀察:標(biāo)曲S5孔有淡藍(lán)色,、Blank孔無明顯藍(lán)色時,即可終止,。
② 儀器判斷:630 nm左右波長下,,ac標(biāo)曲S1孔的OD值達(dá)到0.5 - 0.7、S5孔的OD值達(dá)到0.05 - 0.08,、Blank孔的OD值小于0.05時,,即可終止。
③ 高敏系列試劑盒因靈敏度更高,,需嚴(yán)格控制顯色時長,,可較普通試劑盒適當(dāng)縮短顯色時間。
免責(zé)聲明:
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,,否則所產(chǎn)生的一切后果,,由實驗者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé),。
2. 嚴(yán)格按照說明書操作,,實驗者違反說明書操作,,后果由實驗者承擔(dān),。
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