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(2)酶標板置4℃,包被過夜,。

(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動,。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復洗滌3-4次。

(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的工作液50μl,。

(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min,。

(6)洗板,同(4)。

(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的工作液100μl,。

(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min,。

(9)洗板,同(4)。

(10)每孔加TMB顯色液100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min,。

(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應,。

(12)分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的OD值后,計算S/N值,。S/N≥2.1為陽性判定標準,。

小鼠劑K結(jié)合ELISA試劑盒的使用常識：
（1）試劑切忌與手接觸（有些試劑有強腐蝕性、等特性）,。
（2）要用潔凈的藥勺,，量筒或滴管取用試劑,，絕不允許用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,，應將工具洗凈（藥勺要擦干）后,，才可取用另一種試劑。
（3）試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,，不可放錯瓶蓋和滴管,，絕不允許張冠李戴，用完后請及時將瓶放回原處,，以免遺忘,，帶來不便。
（4）已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)（怕產(chǎn)生原試劑的再次污染）,。?

免責聲明：
1.   試劑盒僅供研究使用,，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果,，由實驗者承擔,，本公司概不負責。
2.   嚴格按照說明書操作,，實驗者違反說明書操作,，后果由實驗者承擔。
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