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(2)酶標板置4℃,包被過夜,。

(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動,。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次,。

(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的工作液50μl,。

(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min,。

(6)洗板,同(4)。

(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的工作液100μl,。

(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min,。

(9)洗板,同(4)。

(10)每孔加TMB顯色液100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min,。

(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng),。

(12)分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的OD值后,計算S/N值,。S/N≥2.1為陽性判定標準,。

人視網(wǎng)膜母細胞瘤蛋白1(RB1)elisa試劑盒的使用常識：
（1）試劑切忌與手接觸（有些試劑有強腐蝕性、等特性）,。
（2）要用潔凈的藥勺,，量筒或滴管取用試劑，絕不允許用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑,。取完一種試劑后,，應(yīng)將工具洗凈（藥勺要擦干）后，才可取用另一種試劑,。
（3）試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,，不可放錯瓶蓋和滴管，絕不允許張冠李戴,，用完后請及時將瓶放回原處,，以免遺忘，帶來不便,。
（4）已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)（怕產(chǎn)生原試劑的再次污染）,。?

免責聲明：
1.   試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗,，否則所產(chǎn)生的一切后果,，由實驗者承擔，本公司概不負責,。
2.   嚴格按照說明書操作,，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔,。
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