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(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜,。

(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng),。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次,。

(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的工作液50μl,。

(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。

(6)洗板,同(4),。

(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的工作液100μl,。

(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。

(9)洗板,同(4),。

(10)每孔加TMB顯色液100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min,。

(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。

(12)分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。

(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的OD值后,計(jì)算S/N值,。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

小鼠促黑色素細(xì)胞激素釋放因子(MRF)elisa試劑盒的使用常識(shí)：
（1）試劑切忌與手接觸（有些試劑有強(qiáng)腐蝕性,、等特性）,。
（2）要用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑,，絕不允許用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑,。取完一種試劑后，應(yīng)將工具洗凈（藥勺要擦干）后,，才可取用另一種試劑,。
（3）試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,，不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管，絕不允許張冠李戴,，用完后請(qǐng)及時(shí)將瓶放回原處,，以免遺忘，帶來不便,。
（4）已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)（怕產(chǎn)生原試劑的再次污染）,。?

免責(zé)聲明：
1.   試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),，否則所產(chǎn)生的一切后果,，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé),。
2.   嚴(yán)格按照說明書操作，實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),。
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