產品名稱：豬流行性腹瀉病毒定量RT-PCR檢測試劑盒

品牌：佰利萊

產品規(guī)格：50T

組成及試劑配制:

1,、 酶標板：一塊（96孔）

2、 標準品（凍干品）： 2瓶,，請臨用前15分鐘內配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘,，同時反復顛倒/搓動以助溶解,，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋）,，分別配制成200 U/L,，100 U/L,，50 U/L，25 U/L,，12.5 U/L,，6.25 U/L，3.12 U/L,，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可,，其余濃度以此類推,。

3、 樣品稀釋液：1×20ml,。

4,、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5,、 檢測稀釋液B：1×10ml,。

樣本采集、存放及運輸：

1,、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集,。

2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,，-70℃以下可長期保存,，但應避免反復凍融（zui多凍融3次）。

3,、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸,。

特點優(yōu)勢：

1.特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,，可實現對種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%,。

2.重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,，重現性為100%。

3.靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,，當樣品中的濃度達到103cfu/ml時,，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程,。

4.實用性：檢測范圍廣,，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,，整個檢測過程為3-4個小時,。

5.優(yōu)勢1：序列資源豐富,，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯,，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性,。

6.優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源,，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。

使用方法：

注：所有試劑使用前需*解凍,，混合均勻,，6,000rpm離心數秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,，具體提取方法請參照相關說明書,。陽性質控品及陰性質控品無需提取，可直接使用,。

2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）取N個（N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品）PCR反應管,，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液,、RT-PCR酶所需總量,，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶,。

1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,，轉移至樣本處理區(qū)。

2.豬流行性腹瀉病毒定量RT-PCR檢測試劑盒加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物,、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s,，轉移至擴增區(qū),。
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