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抗體保存溫度和條件
抗體的保存方法一般會(huì)直接影響抗體的活性和使用效果,。在保存得當(dāng)?shù)那闆r下,大部分抗體可以存放數(shù)月甚至數(shù)年,,一般情況需嚴(yán)格按照抗體說(shuō)明書(shū)來(lái)進(jìn)行保存,。
抗體保存溫度和條件:
1、抗體收到后,,需在12000rpm離心1~5分鐘,,再打開(kāi)管蓋進(jìn)行分裝和保存,如果抗體體積不足50 ul,,可延長(zhǎng)離心時(shí)間至 5 分鐘,,從而確保抗體全部離心下來(lái),。
2,、 對(duì)于多數(shù)抗體而言,分裝成小等份并凍存于-20℃或-80℃是zui jia選擇,。腹水形式的產(chǎn)品收到后需立即凍存,,因?yàn)樵擃?lèi)產(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長(zhǎng)期在置于4℃條件會(huì)導(dǎo)致抗體的降解,。
分裝成小等份可zui大程du減少由凍融造成的損傷,,以及從單個(gè)試劑瓶中多次吸取而引入的污染。
小等份只需凍融一次,,如有剩余,,可將剩余物保存于4℃。小等份的量取決于實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)中通常采用的量,。小等份應(yīng)不小于10μl,;等份越小,儲(chǔ)液濃度因抗體蒸發(fā)及吸附于保存瓶表面而受到的影響越大,。
抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完,,在4℃盡量不要超過(guò)1天。
3,、抗體的運(yùn)輸:一般選擇4℃運(yùn)輸,,避免了反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害;如若選擇干冰運(yùn)輸,,收到抗體是冰凍的,,分裝時(shí)解凍,會(huì)增加一次凍融的過(guò)程,,所以運(yùn)輸過(guò)程中盡量避免干冰運(yùn)輸,。
短期保存
大部分抗體收到后4°C短暫保存1-2周,,對(duì)抗體活性是沒(méi)有影響的。
如果要長(zhǎng)期保存則最好是在-20°C,,最關(guān)鍵的一點(diǎn)是要根據(jù)說(shuō)明書(shū)推薦的方式來(lái)正確的保存抗體;
腹水形式的產(chǎn)品請(qǐng)?jiān)谑盏胶罅⒓磧銎饋?lái),,因?yàn)樵擃?lèi)產(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長(zhǎng)期在4°C保存會(huì)導(dǎo)致抗體的降解,。
稀釋到工作濃度的抗體,,在4°C保存不得超過(guò)一天。
高濃度保存的蛋白質(zhì)更不易降解,,理想濃度是1mg/mL或更高,。因此,在-些抗體工藝中會(huì)加入一些穩(wěn)定劑(如BSA) 從而盡可能減少抗體結(jié)合到容器壁上造成的損失,。但不能在偶聯(lián)抗體(如偶聯(lián)有熒光染料,、酶或生物su)中加入穩(wěn)定劑,因?yàn)榈鞍踪|(zhì)穩(wěn)定劑會(huì)與抗體競(jìng)爭(zhēng),,降低偶聯(lián)效率,。
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