每一盒ELISA試劑盒里面都有一份對應(yīng)的說明書,，而每一份說明書里都會有寫樣本和稀釋液的稀釋比例,，為什么樣本都需要稀釋呢?今天上海佰利萊生物為您分析：為何ELISA實驗血清樣本都需要稀釋?

ELISA試劑盒實驗稀釋血清的步驟：
先把蛋白稀釋一定的倍數(shù),，比如說10倍,、20倍稀釋（這樣可以大體確定一個參數(shù)）,，將抗原進行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板，再用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清進行孵育后洗滌,，再加酶結(jié)合物進行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗滌后,，加底物溶液顯色,，終止反應(yīng)后分別測定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度,。

一般總是要選擇那個O.D值稍大于1.0,，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求<0.1-0.2,。也就是要求陽性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別,。

在ELISA試劑盒實驗血清為什么要稀釋？有兩個原因：
1）競爭抑制比較明顯,，應(yīng)稀釋競爭物,；
2）以降低非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來,。血清稀釋用普通的PBS即可,，可加1％的BSA，能有效降低ELISA本底,，當(dāng)然如果你嫌麻煩我覺得用生理鹽水替代PBS關(guān)系也不大,。不管你是用直接競爭還是間接競爭，血清的稀釋倍數(shù)肯定要事先確定,，但也不用yi點點,，你做一個預(yù)試驗即可，選擇OD在1.0左右的稀釋倍數(shù),，即你的競爭ELISA中陰性孔OD在1.0,，這樣作出來的曲線比較敏感。

看了這些您知道ELISA試劑盒實驗稀釋血清的步驟嗎,？上海佰利萊生物以解決您的問題為己任,，不斷完善自身,，提高企業(yè)文化，以便更好的服務(wù)于科研事業(yè),，歡迎您的來電,。