ELISA即酶聯(lián)免疫吸附法,，是一種常用的固相酶免疫測定方法,。由于LISA方法簡單 ,方便,，靈敏，特異性強且不需要特殊設備(只

需要酶標儀就可以) ,所以被廣泛應用于各種抗原和抗體測定,。

但是影響ELISA測定的因素有很多,，而其操作中需要有一定的技術要求， 如操作手法,環(huán)境,，樣本等,有時?？梢姷揭恍╁e誤結(jié)

果(即假陽性或假陰性)等，上海佰利萊生物為大家解讀ELISA檢測的影響因素之一樣本的影響

樣本的影響有哪些?

1,、樣本的保存:在冰箱中保存過久的標本,，在間接法ELISA測定中會導致本底過深、會造成假陽性;為避免上述問題,，在ELISA試劑

盒測定血清標本時最好能新鮮采集;如果不能立即測定,根據(jù)相應的時間保存相應的溫度,，5 d內(nèi)測定的血清標本可存放于4C，1周后測定的

血清標本應-20C低溫凍存;如凍存后融解的標本,，蛋白質(zhì)局部濃縮,，分布不均，應充分混合后再測定,但混勻時應輕柔,不可強烈振蕩,。

2,、樣本的時間:因為塑料試管能吸附抗原物質(zhì)，所以樣本長時間放在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性,。恰當?shù)姆椒ㄊ?/p>

使用真空采血管;并使用非抗凝標本,，肝素抗凝血漿會增加D值，EDTA,、 酶抑制劑(如NaN3) 可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性,。

3、樣本受細菌污染:因菌體中可能會含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,，因此,，被細菌污染的標本同溶血標本一樣,可能會產(chǎn)生非特異性

顯色而干擾測定結(jié)果。

4,、樣本的凝固:樣本凝固不全,。在實驗中,，有的時候心急為了爭取時間快速檢測，ELISA試劑盒在血液還未開始凝固的時候就強行

離心分離血清,導致血清中仍殘留部分纖維蛋白原,，在ELISA測定過程中形成肉眼可見的纖維蛋白塊,，易造成假陽性結(jié)果;因此血液標本采集

后必須使其充分凝固后再分離血清。

5,、樣本溶血:溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性,。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(zhì)(紅細胞或血紅蛋白

中的亞鐵血紅素),，ELISA試劑盒在洗滌過程中往往難以*洗脫,，它可使H202釋放出原生態(tài)氧(0)，從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶

性的有色物質(zhì),，即顯藍色,，產(chǎn)生假陽性[2]。所以嚴重溶血標本禁用,。

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