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間接法是檢測抗體常用的方法,，其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,，故稱為間接法。操作步驟如下：

⑴將特異性抗原與固相載體連接,，形成固相抗原：洗滌除去未結合的抗原及雜質,。

⑵加稀釋的受檢血清：其中的特異抗體與抗原結合，形成固相抗原抗體復合物,。經洗滌后,，固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質由于不能與固相抗原結合,，在洗滌過程中被洗去,。

⑶加酶標抗抗體：與固相復合物中的抗體結合，從而使該抗體間接地標記上酶,。洗滌后,，固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體,，可用酶標羊抗人IgG抗體,。

⑷加底物顯色：顏色深度代表標本中受檢抗體的量。

本法只要更換不同的固相抗原,，可以用一種酶標抗抗體檢測各種與抗原相應的抗體,。

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