溶性微粒（英文名：Sub-visible Particle/Particulate matter）與可見異物（Visible Particle）相對應(yīng)，意指不溶于水或有機溶劑,，非代謝性的,，肉眼所看不見的顆粒物。在一些注射劑應(yīng)用中,，要盡可能避免不溶性微粒,。對微粒的微觀大小的測量和分析，一直是應(yīng)用中的難題,。本文試圖從粒徑分析（粒度分布）的技術(shù)測量手段入手,，對注射劑的粒度評價手段做一些探討。

什么是不溶性微粒（不可見異物）

        不溶性微粒（英文名：Sub-visible Particle/Particulate matter）與可見異物（Visible Particle）相對應(yīng),，意指不溶于水或有機溶劑,，非代謝性的，肉眼所看不見的顆粒物,。一般指的是粒徑＜50μm的微粒,。

        我們平時生活中常見的概念就是PM2.5 PM10，意指小于等于2.5μm和10μm的懸浮于空氣中的污染物,。

圖一：可見異物VS 不可見異物范圍

        圖一摘自美國藥典章節(jié),，其指明了可見異物，不可見異物和重疊“灰色"區(qū)的粒徑范圍,。

圖二：PSS儀器的檢測范圍和不同顆粒的粒徑大小

不溶性微粒（不可見異物）的來源

外源性：主要包括生產(chǎn)過程中各類包裝容器粘附的各種微粒,，如塵埃，玻璃屑,，有機物,，無機鹽等,；還包括生產(chǎn)設(shè)備長期磨損，相互摩擦撞擊造成的脫落微粒等,。

內(nèi)源性：主要包括生產(chǎn)原料以及生產(chǎn)工藝的操作中所產(chǎn)生的不溶性微粒,，如在使用注射劑等治療疾病的過程中，治療藥物間以及治療藥物與輸入藥液間的理化變化所產(chǎn)生的不溶性微粒,。

注射劑中不溶性微粒（不可見異物）的危害

含有大量不溶性微粒的輸液進入人體可直接造成體溫升高,，心跳加快，更甚可導(dǎo)致休克,。這是由不溶性微粒在身體某部位疊加堆積造成,。主要癥狀有：血管阻塞，刺激發(fā)炎,，肉芽腫,，血液凝結(jié)等。現(xiàn)今各國藥典均把注射劑中的不溶性微粒檢查作為必檢項目之一,，隨著檢查要求越發(fā)嚴(yán)格,，F(xiàn)DA近期望企業(yè)能檢測的下限下探至2μm。

不溶性微粒（不可見異物）藥典歷史

1977年 《中國藥典》規(guī)定使用目視燈檢法對注射液的澄明度檢查,，此法無法檢測小粒子,。

1985年 《中國藥典》規(guī)定注射液微粒限度，方法使用的是顯微計數(shù)法檢測不可見微粒

1995年-2000年 《中國藥典》在檢查方法上增加了光阻法為第二法

2005年 將原《澄明度檢査細(xì)則和判斷標(biāo)準(zhǔn)》修訂為“可見異物檢查法"并將光阻法變成了一法

2015年 《中國藥典》2015年版為現(xiàn)行版本,，基本與《美國藥典》中注射劑不溶性微粒檢測要求基本一致,。

對于不溶性微粒（不可見異物）中國藥典和美國藥典的區(qū)別

雖然中國藥典和USP及其他藥典的檢測標(biāo)準(zhǔn)基本一致，但是也有一些細(xì)微差別,。

表一：CP和USP在顆粒濃度規(guī)定一覽

美國藥典1788章節(jié)介紹

作為USP788的補充章節(jié),，對于檢測方法和儀器作了具體要求。具體項目為：

1）體積確認(rèn)（SAMPLE VOLUME ACCURACY）

2）流速校準(zhǔn)(SAMPLE FOLOW RATE)

3）校準(zhǔn)確認(rèn)(CALIBRATION)

4）分辨率確認(rèn)(SENSOR RESOLUTION),。

不溶性微粒（不可見異物）小知識

成人的毛細(xì)血管內(nèi)徑僅 4 ～ 7μm,，嬰幼兒的毛細(xì)血管則更細(xì)。只有粒徑小于2μm的微粒才可能通過腎交換被排出體外,，直徑超過毛細(xì)血管內(nèi)徑的微粒則無法排出,。較大的微粒可造成局部循環(huán)障礙,，粒徑為2～10 μm 的微粒則可能造成潛伏性的危害,。

所以，F(xiàn)DA新EXPECTATION如下圖：

          圖三：FDA期望檢測2-10μm間的粒子             圖四：FDA期望0.2μm上下的粒度信息

不溶性微粒（不可見異物）的整套解決方案

        AccuSizer 780 A2000作為美國PSS粒度儀AccuSizer系列的明星產(chǎn)品,，其512個數(shù)據(jù)通道和32個自定義通道,，不僅滿足了CP2015, USP787,USP788,USP789等現(xiàn)有各國藥典，其多通道的優(yōu)勢更符合未來發(fā)展的趨勢,。其21CFR Part11法規(guī)軟件符合cGMP要求,，含審計追蹤及電子簽名等功能,，不僅可以直接給出各國藥典標(biāo)準(zhǔn)報告并且判斷是否符合標(biāo)準(zhǔn)，也可自定義報告模板,，適應(yīng)不同的檢測需求,。后加小容量檢測報告，大容量檢測報告,。

圖五：PSS軟件出具的不溶性微粒檢測報告

PSS激光粒度儀介紹

AccuSizer780 A2000系列不溶性微粒檢測儀采用單顆粒光學(xué)傳感技術(shù)（Single Particle Optical Sizing）實現(xiàn)了對分散體系中的不溶性微粒量化計數(shù),。其對于微米級大小的顆粒的粒度表征在精確度以及準(zhǔn)確性上有劃時代的意義。美國PSS粒度儀公司的SPOS技術(shù)更是結(jié)合了光阻效應(yīng)和光散理論,，將顆粒計數(shù)的下限下探到0.15μm（150nm）,。

這不僅迎合了更嚴(yán)苛的質(zhì)量要求,，也助力于精密制造對環(huán)境雜質(zhì)的高標(biāo)要求,。

傳統(tǒng)的光散射法如激光衍射法，動態(tài)光散射法在粒度表征中僅能統(tǒng)計出粒徑累積分布,，也即D10,，D50，D90等數(shù)值,。其優(yōu)點在于無需校準(zhǔn),，易于檢測。但對少數(shù)粒子的靈敏性不足,，具體表現(xiàn)為檢測不出少數(shù)粒子的存在,，且其數(shù)據(jù)來源于數(shù)學(xué)算法，往往會成為假性數(shù)據(jù)峰,。SPOS技術(shù)原理圖：

圖六：PSS的SPOS技術(shù)原理及AccuSizer儀器圖

技術(shù)優(yōu)勢：

1.檢測范圍廣,，0.15-5000μm；

2.512數(shù)據(jù)通道,；

3.32自定義通道,；

4.超高分辨率；

5.微量進樣（選配）,；

6.自動進樣（選配）,；

7.兼容水相和有機相； 

8.模塊化設(shè)計,，便于產(chǎn)品升級,；

9.傳感器現(xiàn)場校準(zhǔn)，不需要返,；,。

內(nèi)置ISO,USP等系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)，且可自定義標(biāo)準(zhǔn),；