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培養(yǎng)基特點(diǎn)：

SIM SF Expression Medium培養(yǎng)基為澄清淡黃色透明液體,，如果一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變得渾濁或出現(xiàn)沉淀，請(qǐng)勿使用,。

保存條件：

2~8℃避光保存,，一旦過(guò)期，請(qǐng)勿使用,。

穩(wěn)定性及保質(zhì)期：

室溫下一個(gè)星期內(nèi)穩(wěn)定,。

自收到之日起， 2~8℃避光保存,，六個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定,。

細(xì)胞凍存：

選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，保證活率大于90%,。

制備細(xì)胞凍存液：45%新鮮培養(yǎng)基,，45%條件培養(yǎng)基，10%DMSO,。

200g離心5分鐘,，棄去上清。

用細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞,，細(xì)胞凍存密度為1.2~2×107/ml/ml,。

迅速轉(zhuǎn)移重懸的細(xì)胞至無(wú)菌的凍存管中，每管1~2ml,。

將凍存管放入程序降溫盒中,，-70℃冰箱放置過(guò)夜。

若凍存細(xì)胞需要長(zhǎng)期保存,，將其轉(zhuǎn)移至液氮罐中,。

細(xì)胞復(fù)蘇：

將凍存管迅速轉(zhuǎn)移至27℃水浴中,，進(jìn)行融化。

將融化的細(xì)胞轉(zhuǎn)至無(wú)菌的含5-10ml新鮮培養(yǎng)基的無(wú)菌離心管中,。

200g低速離心5分鐘,，緩慢倒掉上部培養(yǎng)基，不要將沉降的細(xì)胞懸起,。

用10-20ml新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，確保重懸后的細(xì)胞密度大于1×106/ml左右。

將重懸的細(xì)胞放入無(wú)菌培養(yǎng)瓶中,，旋蓋擰松,，放在搖床中懸浮培養(yǎng)。

當(dāng)細(xì)胞密度生長(zhǎng)達(dá)到2~4×106/ml時(shí),，可以進(jìn)行傳代,，傳代時(shí)細(xì)胞接種密度為0.8-1×106/ml。