目錄:天津益元利康生物科技有限公司>>產(chǎn)品>>試劑>> PRIME-P100-100MGPEI瞬時轉(zhuǎn)染試劑
| 純度 | 詳詢 | 分子量 | 詳詢 |
|---|---|---|---|
| 分子式 | 詳詢 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 規(guī)格 | 100MG | 貨號 | PRIME-P100-100MG |
| 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 | 主要用途 | 轉(zhuǎn)染 |
產(chǎn)品名稱：PEI瞬時轉(zhuǎn)染試劑
產(chǎn)品簡介：
PEI線性轉(zhuǎn)染試劑（PEI Prime Powder, Transfection Grade Linear Polyethylenimine）：PEI Prime是以一種陽離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethylenimine,，PEI)為載體的基因轉(zhuǎn)染試劑,。PEI是在pH中性溶液中具有*正電荷密度的合成聚合物。帶正電的PEI與帶負電的DNA牢固結(jié)合,，并賦予凈陽離子電荷,，使DNA進入細胞。PEI Prime是一種高性能轉(zhuǎn)染試劑,，利用PEI的特性旨在實現(xiàn)高產(chǎn)量,，可重復性和可擴展的瞬時基因表達。
應用范圍：
PEI轉(zhuǎn)染試劑能夠高效率轉(zhuǎn)染多種細胞系,，包括貼壁細胞和懸浮細胞,。此外，PEI是用于HEK293和CHO懸浮細胞轉(zhuǎn)染的試劑,。PEI轉(zhuǎn)染試劑是生產(chǎn)任何具有成本效益的生物制劑的合適選擇,，包括重組蛋白，抗體和病毒,。
PEI線性轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品優(yōu)勢：
1. 低毒,，高效
2. 操作簡單，高性價比
3. 可提供可靠,、具有可重復性的轉(zhuǎn)染結(jié)果
4. 適用于快速,、高通量轉(zhuǎn)染流程
轉(zhuǎn)染步驟:
-以HEK293貼壁細胞為例，步驟如下：
1. 細胞接種：細胞密度2-6 x106 cells/mL,。
2. 質(zhì)粒的準備：在5％最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中,，每106個細胞稀釋1.0 ug pDNA。
3. PEI的準備：在5％最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中,，每106個細胞稀釋3.0 ug PEI Prime,，混勻。
4. 通過快速,，短暫渦旋或顛倒數(shù)次試管,，將pDNA和PEI Prime溶液混合在一起,。
5. 使pDNA和PEI的混合物在室溫下靜置10分鐘。
6. 一邊旋轉(zhuǎn)板,，一邊將pDNA和PEI混合物逐漸滴加到細胞中,。
7. 于37℃ CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
轉(zhuǎn)染的優(yōu)化：
為達到高轉(zhuǎn)染效率和低細胞毒性的理想結(jié)果,，可以進行如下優(yōu)化：
參數(shù) | 范圍 |
PEI濃度 | 3.50-6.50mg/（L final culture） |
DNA濃度 | 0.75-1.5mg/（L final culture） |
PEI/DNA混勻時間 | 5.0-15.0minutes |
與市場同類品牌的PEI轉(zhuǎn)染效率的對比：
使用PEI Prime（PEI:DNA濃度比3：1）或某國外品牌PEI,，用CMV-SEAP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染20ml 含HEK293懸浮細胞的培養(yǎng)物。 轉(zhuǎn)染后5天,，使用磷酸酶報告染料和UV / Vis檢測SEAP表達水平,。數(shù)據(jù)表示占某國外品牌PEI的SEAP表達水平的百分比。結(jié)果顯示我們的PEI Prime 的轉(zhuǎn)染效率比國外同類廠家高出40%,。
4
化工儀器網(wǎng)