以下是美天旎(Miltenyi Biotec)MACS組織保存液(假設為類似產(chǎn)品,,如 Tissue Storage Solution 或 樣本保存液)的標準使用方法的詳細說明,具體操作需根據(jù)實際產(chǎn)品名稱和說明書調(diào)整:
一,、產(chǎn)品用途
用于 新鮮組織樣本的短期保存與運輸,,維持細胞活性及完整性,適用于后續(xù)的細胞分離(如MACS磁珠分選),、流式分析,、核酸提取等實驗。
二,、使用步驟
1. 樣本采集與處理
組織處理:
使用無菌器械快速采集目標組織(如腫瘤,、淋巴結等)。
將組織切成 3-5 mm3小塊(減少中心缺氧壞死),。
用預冷的 PBS或生理鹽水 沖洗,,去除血液和殘留物。
2. 浸泡保存液
保存液體積:組織體積與保存液比例為 1:5~1:10(如1g組織需5-10ml保存液),。
操作步驟:
將組織塊浸沒于保存液中,。
輕柔搖晃容器,確保液體充分接觸組織,。
密封容器,,標注樣本信息(名稱,、日期等)。
3. 保存與運輸條件
溫度要求:
短期保存(<24小時):2-8℃冷藏,。
長期保存(>24小時):-80℃冷凍(需確認保存液是否耐凍),。
運輸:使用冰盒或干冰維持低溫,避免反復凍融,。
4. 后續(xù)處理
解凍(如冷凍保存):
37℃水浴快速解凍(避免長時間高溫),。
解凍后立即用冷PBS清洗組織2-3次,去除殘留保存液,。
細胞分離:
按標準流程進行組織消化(如膠原酶處理),。
使用美天旎 MACS磁珠分選試劑盒 進行目標細胞分離。
三,、注意事項
保存時間限制:
冷藏保存建議 ≤72小時,,超時可能影響細胞活率。
冷凍保存需驗證保存液兼容性(部分含DMSO的保存液適合凍存),。
避免污染:
操作全程保持無菌條件,,保存液開啟后需分裝,避免多次使用,。
組織類型適配性:
實體器官(肝,、脾)適用性高;
脂肪或纖維化組織需延長消化時間,。
保存液成分:
若含蛋白酶抑制劑(如EDTA),,需避免與后續(xù)消化酶沖突。
四,、常見問題解答
Q1: 保存液是否可以替代細胞凍存液,?
否。組織保存液主要用于短期維持活性,,若需長期凍存細胞,,需使用含 DMSO/FBS 的專業(yè)凍存液。
Q2: 組織保存后細胞活率下降明顯,?
可能原因:
保存溫度波動(未嚴格保持2-8℃),;
組織塊過大導致內(nèi)部缺氧壞死;
保存時間超過推薦期限,。
Q3: 能否與其他品牌的磁珠分選試劑聯(lián)用,?
需驗證兼容性,建議使用美天旎 MACS Buffer(貨號130-091-221)清洗樣本,,避免殘留保存液影響分選效率,。
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