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問充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)是一種源自中胚層的多能干細(xì)胞,，能夠從骨、脂肪,、臍帶,、胎盤、臍血,、皮膚等多樣的組織里分離獲取,，具有強大的增殖能力和多向分化潛能，不僅能分化為成骨細(xì)胞,、軟骨細(xì)胞,、脂肪細(xì)胞等，還能分化為肌細(xì)胞,、肝細(xì)胞,、胰島細(xì)胞等多種細(xì)胞類型。間充質(zhì)干細(xì)胞在組織工程,、基因治療和免拉治療等諾多方面展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用前景,，為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域帶來了新的希望和突破方向，對于多種疾病的治療和研究都有著重要意義,。

一,、小鼠脂肪組織獲取

1.3天齡到4周齡(推薦小周齡)小型，頸椎脫白法處死后于75%酒精浸10min,。

2.將小鼠橫向,，背面朝上放置，背部中心嬰向剪開皮膚1cm;沿著開口處撕去腹股溝皮膚,，暴露對稱的腹股溝部位白色胎肪組織,，鈍性剝離。

二、胎肪MSC分離培養(yǎng)(酶消化法)

1. 消化:取脂肪組織25mL,，4°℃ PBS沖洗3次,，去除筋膜及紅細(xì)胞，眼科剪剪碎,，4°CPBS沖洗3次,，每5mL脂防分裝入50mL離心管，加入2倍體積的0.075961型膠原,，37℃恒溫?fù)u床以80r/min的搖速震蕩消化1h,，待充分消化后，加入與酶等體積的含10%FBS的DMEM-F12完quan培養(yǎng)基終止消化,。

2. 離心與計數(shù):300g,，離心10min，去除上層未消化的脂肪組織,、油脂及中層潔液,，5mL紅細(xì)胞裂解液重懸沉淀，室溫靜置5min,，200g,，離心5min，去除上清液,，完quan培養(yǎng)基重懸沉淀,，200日網(wǎng)過濾后，取樣計數(shù),，根據(jù)計數(shù)結(jié)果調(diào)整細(xì)胞濃度,，最終以(1-5)x101/cm2接種于培養(yǎng)皿中，置于37℃℃,，5%C0,培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

3. 接種培養(yǎng):48h后換液，之后每3d換一次液,，待細(xì)胞生長至80%-90%融合時,，用體積分?jǐn)?shù)0.25%膚蛋白酶消化后按1:2傳代培養(yǎng)。

天津益元利康生物科技有限公司,，成立于2018年，坐落于天津經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū),。公司產(chǎn)品線涉及細(xì)胞與基因治療,、免疫學(xué)、分子生物學(xué),、細(xì)胞生物學(xué)等多個方向,，專注于生命科學(xué)試劑、耗材,、細(xì)胞,、儀器等產(chǎn)品銷售,，經(jīng)營的品牌主要有：ThermoFisher、Sigma,、Qiagen,、EZBioscience、ZYMO Research,、MedKoo,、Abcam、BioLegend等等,。我們提供質(zhì)優(yōu)價美的產(chǎn)品,、及時到位的服務(wù)，努力成長為生命科學(xué)和生物技術(shù)企業(yè)的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商,。